巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验报告.docx

巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验报告实验二一巨噬细胞吞噬功能实验【原理】巨噬细胞是单核吞噬细胞系统的主要细胞,局域活跃的吞噬功能。吞噬细胞受抗原刺激后活化,可使吞噬功能明显增强。在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡血红细胞,30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷亚甲蓝染色,显微镜下计数吞噬红细胞的百分数,及观察吞噬细胞内鸡红细胞的数目,以判断吞噬细胞的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。【方法】体内法: 实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。实验时,每只小鼠注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使其在腹腔中分布均匀,利于吞噬。 30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用载玻片轻擦腹腔,使腹腔液均匀涂于载玻片过,再滴一滴%冷亚甲蓝溶液,盖上盖玻片。高倍镜下进行观察,计数。【结果】【分析】在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液,可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并且可看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。二沉淀反应双向琼脂扩散实验【原理】将可溶性抗原与相应抗体分别加入琼脂板上的孔内,二者均可发生扩散,并且随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。本实验是定性实验,常用于分析抗原抗体的纯度关系以及相互关系。【方法】制板:将熔化的1%琼脂加在载玻片上约5ml 打孔:待琼脂凝固后,将载玻片置于打孔样板上,用打孔器打孔加样:在中央孔内加抗体,上下两孔加抗原1,左右加抗原二,每孔加10μl 结果观察:将琼脂板置于湿盒,37℃一天后观察结果。【结果】在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线,有抗原抗体反应,为阳性反应,说明抗原1与抗体相对应。中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线,说明抗原2与抗体之间不相对应。【分析】抗体与抗原发生扩散时,随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。当有沉淀线出现时,说明有抗原抗体反应。琼脂铺板时要一次铺成,并且铺设均匀。打孔时要注意垂直打孔,注意不要有裂隙产生。实验一巨噬细胞吞噬细胞功能实验原理:巨噬细胞具有活跃的吞噬功能,能清除体内抗原物质及变性的细胞,在特异性及非特异性免疫中均起重要作用。巨噬细胞受抗原刺激后活化,可使其吞噬功能明显增强。此次实验我们用体内法来介绍巨噬细胞的吞噬功能。体内法:在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡红细胞,30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷美兰染色,显微镜下计数吞噬鸡红细胞的百分数,及观察巨噬细胞内被杀死而染为紫色的鸡红细胞的形态、数目,以判断巨噬细胞的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异性免疫水平。方法:试验前3天,小白鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。实验时,每只小鼠腹腔注射鸡红细胞1ml,轻柔腹部,使鸡红细胞在腹腔中分布均匀,利于吞噬。 30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用滴管取出腹腔液,均匀涂布于载玻片上,然后再滴一小滴%冷美兰溶液,盖上盖玻片高倍镜下进(来自:写论文网:巨噬细胞吞噬鸡红细胞的实验报告)行观察,计数。实验结果:100个巨噬细胞中已吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞的数目吞噬百分率=———————————————————×100% 100个巨噬细胞 100个已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞中鸡红细胞的数目