达肝清颗粒提取工艺的研究.docx

达肝清颗粒提取工艺的研究作者:吴玉强,邓家刚,王志萍,冯旭【摘要】目的优选达肝清颗粒最佳的提取工艺。方法采用正交实验法,以人参皂苷Rg1含量及干膏率作为评价指标,筛选最佳的提取工艺。结果达肝清颗粒最佳提取工艺为:药材加10倍量水提取2次,1h/次,第1次提取前先将药材浸泡1h。结论优选出的达肝清颗粒的提取工艺稳定合理可行。【关键词】达肝清颗粒;提取工艺;正交设计;人参皂苷Rg1病毒性肝炎是由多种肝炎病毒引起的常见传染病,我国病毒性肝炎发病数位居法定管理传染病的第一位,仅慢性乙型肝炎病毒携带者就达亿[1]。慢性乙型肝炎病程迁延,如得不到及时的治疗,将会发展为肝硬化甚至肝癌,严重危害人类健康[2]。达肝清颗粒原方系长期用于临床实践的经验方——达肝清汤剂。其由广西特色药材绞股蓝、三姐妹、黄根等7味药组成,具有清热解毒、益气健脾、利湿等功效。现代药理研究表明达肝清有保肝降酶、抗乙肝病毒、提高免疫功能[3]、抗肝纤维化[4]的作用。为了将达肝清汤剂更好地应用于临床上,广西中医学院研究开发出服用、携带方便的达肝清颗粒剂,并对其制备工艺进行了研究。现报道如下。 1仪器和材料仪器与设备RE-52A旋转蒸发仪;Agilent1100高效液相色谱仪;HB43水分测定仪。材料绞股蓝、三姐妹、黄根等多味药材均购自南宁市日益旺中草药材经营部,经鉴定为正品。人参皂苷Rg1标准品购自中国药品生物制品检定所。 ,有效成分众多,因此以干膏率作为考察指标之一较全面合理,君药绞股蓝的主要有效成分为人参皂苷Rg1,故将人参皂苷Rg1作为考察指标。.2 、三姐妹等药材适量,共9份,根据L9(34)正交实验设计表,将药材浸泡适当时间后提取。提取完毕后浓缩到密度/ml(60~70℃),醇沉(水提液∶95%乙醇=1∶2,醇沉2h),弃去沉淀,得醇沉液,测量其体积,备用。将不同条件下的水提液分别浓缩至相对密度为,称重。称取g,分别置于已恒重的蒸发皿中,水浴蒸干,并于105℃干燥至恒重,取出,置于干燥器中放置30min,迅速精密称定干膏重量。干膏率=干膏重×浓缩液总重取样量×生药总量×100%.人参皂苷Rg1的测定方法色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,乙腈-水为流动相;检测波长为20nm。柱温为35℃,流速为1ml/min,理论塔板数按绿原酸峰计应不低于000。对照品溶液的配制:精密称取人参皂苷Rg1适量,加甲醇溶解,制成每毫升含人参皂苷的溶液,即得。供试品溶液的配制:精密量取50ml醇沉液放入蒸发皿中,水浴蒸干,加30ml水溶解,用水饱和正丁醇萃取3次,30ml/次,合并萃取液,再用氨试液(氨水∶水=1∶)洗两次,40ml/次,蒸干正丁醇,加适量甲醇溶解,将甲醇液移至10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀。取部分溶液离心20min,即得。测定法:分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪测定其峰面积,计算人参皂苷Rg1含量。.,每个因素选取3个水平,编制4因素3水平表。见表1。,根据L9(34)正交表安排,分别