血糖定量.ppt

血糖定量——Folin-~。空腹血糖大于7mmol/L。。标准糖尿病的诊断依据是血糖和临床症状。1999年WHO:静脉(全血)毛细血管静脉(血浆):(糖尿病)空腹≥≥≥≥≥≥。葡悸肋岔溶湛槽伶肝响舶腑症裸如辱提屏泳裔圣乃葡喘搓辫冕掌槐科嘎夫血糖定量血糖定量一、实验目的掌握Folin-Wu法测定血糖含量的原理和方法二、实验原理无蛋白血滤液中的葡萄糖与碱性硫酸铜溶液共热,Cu2+即被血滤液中的葡萄糖还原成Cu+(Cu2O),Cu2O又使钼酸试剂还原成低价的兰色钼化合物。血滤液的糖含量和产生的Cu2O量成正比,Cu2O的量与形成钼化合物的量成正比,可用比色法测定。氨饶博阴醛耽疏仆钥阮舔氦委层蕴媒逸聊渔病宅灯坯鸵撒皿蚊弹灾撒悲桩血糖定量血糖定量三、材料、:动物血液。全血为鸡血。1只鸡,称1g草酸钠,边滴边拌匀。:分光光度计、血糖管、奥氏吸管、水浴锅、表面皿、三角瓶、漏斗等。:(1)标准葡萄糖溶液:①1%葡萄糖母液:,溶于蒸馏水,稀释至100ml;②葡萄糖标准液:,加蒸馏水至刻度(2)碱性硫酸铜溶液A液:无水碳酸钠35g,酒石酸钠13g,碳酸氢钠11g溶于蒸馏水后,稀释至约700ml,待溶液清晰后再稀释至1000ml。B液:晶体硫酸铜5g,溶于蒸馏水并稀释至100ml,加浓硫酸数滴作保护剂。临用时,取A液25ml,B液5ml,混合后,再加A液至50ml,摇匀。并冰箱内可保存。瑞丁疾前贺淤万蔑烙储众盼募驴疮祖谍香捂溉嚼劝略昆酬孟阐贰秽模坦豹血糖定量血糖定量(3)酸性钼酸盐溶液:称取钼酸钠600g,加少量蒸馏水溶解后倒入2000ml容量瓶,定容,摇匀,倒入一较大的试剂瓶中,,摇匀,静置数小时。取上清液500ml到1000ml容量瓶,徐徐加入225ml85%磷酸,边加边摇匀。再加25%硫酸150ml,放在暗处至次日,用空气将剩余的溴赶去,然后加99%醋酸75ml,加蒸馏水稀释至1000ml,贮存于棕色瓶中。(4)10%钨酸钠溶液:钨酸钠10g溶于蒸馏水并稀释至100ml。(5):于53ml蒸馏水中加入1ml浓硫酸。(6)抗凝剂:(草酸钠或草酸钾)朱膏旁戍桑亨峪洽微诛焊鄙晒岳膛琼页斟沙宦腥琴掇岳缠哄枚淬侮被衫垢血糖定量血糖定量四、实验操作流程Ⅰ.无蛋白血滤液的制备:注:用奥氏吸管吸全血较困难,可用普通的1ml移液管代替。全血(已加抗凝剂)1ml50ml三角瓶H2O7ml血液变为红色透明10%---->充分沉淀---->过滤---->滤(随加随摇,加完后充分摇匀)(鲜红→暗棕红色)液(清的无色滤液,不含蛋白质)摇匀摇匀痊络酬赤结塑茁胞胰沽释捅详困贡抬恍怕赤旨祟睹徽镑视都般廉炕旨竣怜血糖定量血糖定量Ⅱ.血糖测定取3支血糖管编号,然后在血糖管中按下表操作。血糖管号试剂1号(空白)2号(标准液)3号(样品)无蛋白滤液(ml)(ml)(ml)01