金黄地鼠乳鼠轮状病毒感染的致病机理研究（可复制论文）.pdf

金黄地鼠轮状病毒感染的致病机理研究仕嗯┮荡笱В贾荩李霞摘要轮状病毒是全世界婴幼儿和幼龄动物致命性腹泻的主要病原,它的发病机理到目前还不太清楚。在本实验中,用自然感染的金黄地鼠乳鼠来研究感染后机体多系统功能结构在组织学和临床表现等方面的相应病理变化。具体方法是将各系统的组织取样、固定、染色以便进行病理观察;采外周血做血常规生化检查;制小肠组织冰冻切片做旧ǎ恢胸腺和淋巴结涂片做酯酶染色。以和椒ㄖ苯尤范ú≡狝组。主要病理变化表现为肠道上皮细胞严重的黏液变性,在心肌细胞和肠道上皮细胞的胞浆中发现病毒包涵体,肠道外器官表现为一般性的变性、坏死和水肿。另外发现萎缩和脂肪变性只出现在心肌细胞中,玻璃样变只发生于肾脏,而充血、淤血和出血是肺脏的主要变化。在电镜中可看到呈簇或单个出现的粒子在肠道上皮细胞的胞浆内。在感染期间,红细胞、白细胞和血红蛋白在外周血中的含量极显著地下降,而同时白细胞中的中性粒细胞却明显上升,淋巴细胞明显降低。淋巴结中的馨拖赴仙叵中的小馨拖赴聪陆怠3︷つど系腁活性明显升高。红细胞发生大小不一、形态各异、染色异嗜性的变化。本实验的结论是:金黄地鼠乳鼠是镽囊赘卸铮心肌细胞和肠道上皮细胞是的靶细胞;主要的病理变化是肠道上皮的黏液变性,并累及多系统器官的一般变性;感染可引起机体营养不良、贫血、水肿和免疫低下;肠黏膜上的钚栽銮俊关键词:金黄地鼠、轮状病毒、病理学
腥玖餍械墓媛上嘁恢隆!6嘣谇锒荆谂懦酥虏⌒源蟪Ω司茸饔煤螅生条件好的国家也未能避免,而且没有特效的药物和疗法。诙镏泄惴捍嬖冢谌貉动物中时常爆发,对幼畜的危害也很大,日龄越小,其感染率和死亡率越高,常造成严重的经济损失。由于腥驹谌擞攵锷砩鲜浅T谛痛嬖冢现赜跋烊擞攵锏慕】担⒃斐一定的经济损失,因此研究和探讨的发病机理,对人类健康和畜牧业的发展都有重要意本研究论文在设计之初走访了兰州医学院第二附属医院的小儿科,在调查中发现“治疗感染引起的婴幼儿秋冬季腹泻”是临床医生最为棘手的问题,后来通过调查,发现兰州生物制品研究所动物室的金黄地鼠乳鼠长期有腹泻、臌气和脱肛,且发病的严重程度、时间约敛馐裕っ魇茿组腥尽>谕馕南椎鞑椋壳盎刮醇泄亟鸹频厥轮状病毒感染的相关报道,因而遂将本研究论文的设计方案定为“金黄地鼠乳鼠轮状病毒感染的致病机理研究”。,体重雌雄不拘。.约良耙瞧约梁校篟停约梁杏衫贾萆镏破费芯克菰冰冻切片机:青海半导体冰冻切片机厂生产;精密切片机:美国;精密酸度计:泄战鹛炒蟮刈远В光学显微镜:日本琁透射电镜毡。∮氪分四次,每次取自然发病的日龄的金黄地鼠乳鼠只,按批次分别编号为:~正常的唬磁畏直鸨嗪盼#篈~~..~鄄炝俅仓⒆矗⒆鲆韵麓恚》啾悖肞制成%悬液,用约梁胁馐圆⑷氛锶槭驲囊跹粜见图:义。和、~獶;
矍虿裳#鲅39婕觳楹脱M科暇贝λ溃始旃鄄欤赋θ〉┗撼逡河冰箱保存;⌒叵佟⒊ο的ち馨徒幔瞥赏科隽馨拖赴乃嵝詀姿彷刘ッ溉旧ǎ⌒孪实男〕Σ牧献霰城衅靡韵允炯钚粤姿崦傅幕钚裕κ赋Α⒖粘Α⒒爻Α⒚こΑ⒔岢Ω鞫我约靶摹⒏巍⒎巍⑸觥⒛浴⑿叵佟⒊ο的ち馨结等组织块放入%的中性福尔马林液中固定保存,以备做组织切片。检测项目、:漳舅匾梁旧ǎ翰捎檬赋Α⒖粘Α⒒爻Α⒚こΑ⒔岢Ω鞫我约靶摹⒏巍⒎巍肾、脑等组织块做石蜡切片,染色,观察组织病变;甅涎羌桌兑梁烊旧ǎ喝∈赋Α⒖粘Α⒒爻Α⒚こΑ⒔岢Ω鞫危破旧ǎ鄄病毒包涵体;氏改良亚甲蓝碱性品红染色:取十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠各段染色,观察病毒包涵体;瓵甈染色:取十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠各段染色,观察黏液物质和病毒包涵体;啡鹛厥先旧ǎ喝⊙V瞥赏科旧ǎ鄄煅O赴翁⒆霭紫赴掷嗉剖电镜:取十二指肠电镜材料入%戊二醛缓冲液于姹浔4婀潭ㄖ辽后,的蔗糖浩/次琹%的锇酸再固定,的蔗糖涸倨
黏膜和肠腺上有超强反应物的定位磺慷确从ξ锏亩ㄎ;中度反应物的故碱性磷酸酶钚缘牟课幌院谏ǎ篮谏ǖ纳钋吵潭瓤晒兰萍钚粤姿崦活,梯度酒精直鹞ィィィィ%阉M该鳎氧树脂包埋,超薄切片,厚度为.,醋酸铀和柠檬酸铅双重染色,用透射电镜观察。.R撼9嫦钅考觳煜赴紫赴剖何芟∈头ǎ:斓鞍撞舛ǎ荷忱媳壬ǚǎ紫赴掷嗉剖杭啡瑞特氏染色,二区计数法谘F蕉说牧礁銮蚰诟骷霭细胞馨拖赴曛镜募觳方法:取新鲜的胸腺、肠系膜淋巴结组织,除去外周脂肪,用刀片切开,将剖面贴于含有%的小牛血清缓冲盐水的玻片上,用镊子从外缘稍加挤压,使细胞游离,制成涂片,冷风吹干,用%的甲醛液蒸汽固定檬椅律⒎,采用六偶氮副品红姿彷刘ジ牧挤ㄈ旧ǎ途迪鹿鄄臁⒓剖原理:馨拖赴陌诘乃嵝詎一醋酸萘酯酶,在弱酸性的条件下,可使底物姿彷刘ニ獬纱姿岷蛁一萘酚,而练雍土嫉8逼泛炫剂#刹蝗苄缘暮焐沉淀物,,再经甲基绿