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第卷第期山东大学耳鼻喉眼学报年月
. . .【
文章编号:———·眼科学·
体外培养人胚晶状体上皮细胞生长特性的研究
邹俊,卢奕,褚仁远
.上海交通大学附属第六人民医院眼科,上海;
.,上海
摘要:目的观察体外培养人胚晶状体上皮细胞的生物学特性。方法组织块贴壁法培养人胚晶状体上皮细胞,
通过倒置相差显微镜、透射电子显微镜,采用免疫细胞化学法分析人胚晶状体上皮细胞的生长特性。结果体外
培养的原代人胚晶状体上皮细胞在组织块贴壁~后从组织块边缘长出,具有上皮细胞的形态特点,第天
达到融合。第二代人胚晶状体上皮生长曲线近“”形,经过~的潜伏期后进入对数生长期,需左右达到
融合,细胞形态呈六角形或椭圆形、超微结构保持正常,免疫细胞化学法染色结果显示细胞浆内一晶状体
蛋白染色阳性。结论人胚晶状体上皮细胞具有增殖能力,第二代人胚晶状体上皮细胞是进行白内障相关研究
的合适实验对象。
关键词:晶状体;上皮细胞;细胞培养;人胚
中图分类号:. 文献标志码:


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晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表内障术后后囊膜混浊的发生密切相关。体外培养晶
面的单层上皮细胞,其异常增殖、分化与白内障及白状体上皮细胞,是观察晶状
收稿日期:.;修回日期:.—
基金项目海市自然科学基金项目。
作者简介:邹俊一,女,海人,医学瞎:,副主任医师,顾士研究生导师,主要从事眼视光学与屈光于术的础与临床研究:
.
通讯作者:卢奕,男,教授。:..
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体上皮细胞形态变化并研究其生物学特性的基础。长曲线。
1 . 2 . 3 鉴定以 S A B C 法进行免疫细
然而, 人晶状体上皮细胞的体外生长活性较差, 对生细胞免疫学
: 上细胞以 2 × 104/m L
长介质要求高, 体外培养难度较大。我们通过观察胞化学染色将人胚晶状体皮
, 2 d 4 % 聚甲醛固
体外培养人胚晶状体上皮细胞的生长特性, 为从细密度接种于盖玻片上后取出用多
1 m i n B 5 m i n × 3 15 %
胞分子水平研究白内障的发生提供实验基础。定 5 , P S 漂洗次, 小牛血清室温
: 一
封闭 2 0 m in ;滴加 1 5 0 0 兔抗人 a 晶状体蛋白抗体,
1 材料和方法 4 ℃孵育 2 0 h 后 P B S 漂洗 5 m i n × 3 次;再滴加 1 :2 0 0
G 1 h
生物素标记的羊抗兔 I g , 在 3 7 ℃湿盒内孵育;
~ P B S 5 m i n X 3
1 . 1 实验材料选用胎龄为 3 4 个月因外伤而流用漂洗次后滴加链亲和素标记的过氧
1 m i n P B 5 m i n × 3
产的胎儿( 由复旦大学附属妇产科医院及化物酶, 3 7 ℃下反应 5 后 S 漂洗
一
~ m i n
妇婴保健院提供) 。主要试剂为 D M