国产蝮蛇毒蛋白C激活物纯化及鉴定.pdf

国产蝮蛇毒蛋白せ钗锏拇炕凹后,取上清液进行透析,透析液用档穆四す撕螅偻ü齉中文摘要方法以国产蝮蛇毒为原料,嫣跫拢淙芙庥赥撼逡褐校涟枥胄汗朔ǚ掷氪炕疨组分。通过狿鄄霵组分的纯度及分子量,用发色底物法和凝固法分别测定活化蛋白孽0访富钚院涂鼓钚浴<觳獠煌鹗衾胱尤芤骸⒌鞍酌敢种萍痢量左右呈现一条蛋白带,生物学活性鉴定表明,该组份在体外能迅速将蛋白せ钗;罨鞍證,该活化蛋白孽0访富钚!!最高可达到用目的研究国产蝮蛇毒中人血浆蛋白せ钗的分离纯化及其生物学活性,为蛋白幕⊙芯俊⒌鞍證缺乏性疾病的实验室诊断及疗效评价、蛋白破研制及质量控制等提供分析检测基础。离子交换层析和和温度对榉莸挠跋欤幻鱌组份的最佳冻干保护剂和冻干条件,并探索该榉菰赑钚约觳庵械某醪接τ谩结果经两步层析,从蝮蛇粗蛇毒中纯化出榉荩琒—./;在一定浓度范围内,不同浓度组份激活蛋白孽0访富钚院涂鼓钚跃孀榉菖ǘ鹊脑龃蠖撸忻飨的量效关系。生物活性稳定性检测表明,镁离子和金属蛋白酶抑制剂一对该榉莸幕钚砸种谱饔妹飨裕蛔钍蕄—图畈荒退幔嫦禄钚损失严重,应在婊蛞姹4妗>秆『螅范≒组份的最佳冻干保护剂为%白蛋白,此时榉荻掣苫钚曰疚匏鹗А=ǜ肞组份用于法检测活性时,明显延长,抗凝效果明显,但标准曲线线性趋势不明显,还需进一步摸索榉萦階约林涞淖罴驯壤结论采用离子交换层析和凝胶过滤法,可以从蝮蛇粗蛇毒中分离纯化出份,该组份具有较强的激活蛋白哪芰Γ渑ǘ扔肷镅Щ钚猿收喙兀揖有一定的生物学稳定性。关键词:蝮蛇毒;蛋白せ钗铮淮炕中国医学科学院北京协和医学院硕士学位论文
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%.%【。在生理状况下,,被激活为活化蛋白珹⒒涌鼓按傧巳茏饔谩通过蛋白水解作用灭活虵Ⅷ抑制せ钅C冈瓒夏谠葱阅M揪丁A硗猓珹不仅可以促使内皮细胞释放纤溶酶原激活物,,对凝血和纤溶起着重要的调节作用。临床中多以占正常血浆浓度的百分数来衡量的水平。健康成人年人的%。缺乏会使人体的凝血纤溶平衡受影响,使凝血亢进,从而发生血栓性疾病。许多疾病也会影响的含量和活性,因此血浆蛋白钚约觳舛缺陷【俊O忍煨訮毕菔茄Kㄐ纬傻奈O找蛩兀乇鸲阅昵岬难Kɑ颊呃血浆系统检测,必要时对家族成员进行研究,以指导治疗。获得性缺陷以及口服抗凝剂等⋯。发现先天性缺陷症的患者即找出了血栓形成的原因,蛋白低呈侨颂宓闹匾?鼓低持唬饕S裳=鞍證、蛋白、活化蛋白种莆脱Kǖ鹘诘鞍槌伞尽А且恢维生素览敌蕴堑鞍祝筛卧嗪铣桑嬖谟谘=校=。是系统的重要组成之一,是体内重要的抗凝因子,占全血抗凝活性的进而促进纤溶酶原的激活,发挥促纤溶作用水平的低限为%.%,高限为ヒ%【俊3扇薖呐ǘ扔胄员鹞廾显关系。妇女浓度在妊娠期间无明显改变【浚律飨员瘸扇说停挥谐疾病的诊断预防及观察预后有重要价值】。缺陷分为先天性缺陷和获得性说,有%.%是由于缺陷引起的。家庭成员中有基因缺陷者,—岁发生血栓的风险约为%。由于缺陷引起血栓的特点是首次发生血栓的年龄小,血栓发生次数多,所以当临床上遇到有上述特点的静脉血栓形成患者时,应进行可见于肝病、肾病、新生儿特发性紫癜、弥散性血管内凝血⑹质醮瓷可以更好的预防和控制血栓形成。由于华法林的抗凝机理是抑制维生素览性凝血因子活性以减少凝血酶激活物的形成,抑制凝血酶合成,而系统也是维生素览敌缘模识杂诳诜鼓┗7值幕颊撸乇鹗窃缙冢蠵检测,可指导其抗凝治疗、预防血栓【】。肝病患者血浆活性均有不同程度的降低,其下降程度与肝病的严重程度有关,在肝功能严重损伤时,血浆活性的下降比其他依赖维生素囊蜃右Q杆俸兔飨裕虼搜=琍钚约觳饪梢宰为判断肝硬化等严重肝病患者肝功能及其预后的灵敏指标引。因此检测血浆中活性具有重要的临床意义。日Ⅱ舌中国医学科学院北京协和医学院硕士学位论文—!甞——
埘蛇毒中提取出选鉴别研究,并从美洲铜头蝮特异性激活剂——【俊8眉せ罴料忠压惴河τ糜谘Kㄓ胫寡5目蒲杏肓传统的抗凝活性篊觳馐抢肨春衔锝玃せ睿测的活性,复合物是活化的生理性激活物【T谔逋猓渌恍┓生理性激活物亦能激活,如来源于多种蛇毒的特异性激活剂【】。早在八十年代,国外就曾对种蛇毒激活的作用进行过深入细致的筛床检验。迄今已发现近种蛇毒中有能活化的组份,:,