DEAE-纤维素使用说明书.doc

一简介 DEAE-纤维素,它采用平均粒径为50µm的颗粒型亲水高分子聚合物,表面又用大分子糖链接枝,使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性,它在高流水下保持更高载量,同时又具有更好的分辨率。由于比表面积大,平衡和洗脱的时间也更短。它经过接枝即使是纯化病毒,质粒等超大分子的物质,载量基本保持不变。本产品物理和化学稳定性好,使用寿命长,操作方便。二、填料特征: 特点载量大,分辨率好,流速高,使用方便。基质高度交联纤维素配基二乙基氨基乙基配基密度40μmol/ml 吸附载量180mgHSA/ml 填料的颗粒大小50μm 最大流速300cm/h pH范围3-10,在位清洗时pH范围可到2-11 化学稳定性各种缓冲液及盐,,8M脲,6M盐酸胍,乙醇,,120℃30min 保存温度+4~30℃保存干粉,1g=3-4ml 三、应用的注意事项: 1)色谱柱装填 1、所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样,液体最好做脱气处理。填料可直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可. 2、在柱子下端加入20%乙醇,以除去柱子中的空气,关闭柱子出口,在柱内保留少量的20%乙醇。20%乙醇容易产生气泡,可以在里面加1%吐温避免气泡产生。也可以换成纯水装柱子,但是需要把填料中的20%乙醇也换成纯水,具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行,也可以小心倾去填料上的20%乙醇,再换成5倍体积的纯水,反复沉淀去上清,5次左右就可以用于装柱子。 3、此填料颗粒比较细,所以一定要注意柱子要选择合适的筛网,不能漏,也可以取点填料加到筛网上试试,如果没有问题再将填料连续倒入柱子时,要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流,以减少气泡的产生,让填料先自然沉降到填料体积不再变化,而填料和上面的液体很好分层,上层溶液完全澄清,就可以开泵用适当的流速压柱子,填料体积不再变化后,再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。使用的流速要小于装柱子的流速。 4、在装柱子前,填料从冰箱中取出至少要室温放置2-3个小时,这样避免装柱子时由于温度变化而使柱子中产生气泡。 2)蛋白的结合样品的盐浓度和pH要尽量和平衡柱子的缓冲液一致,盐浓度过高