血清清、球蛋白分离.ppt

南方医科大学生物化学与分子生物学实验教学中心血清清蛋白、g-球蛋白的分离、提纯与鉴定篙幕肺防容沏淋筑逆塑毕纲雕絮翔期杖够裕堰桓削郴贰妮阶涂秀瘤道始硼血清清、球蛋白分离血清清、球蛋白分离内容实验目的1实验原理2实验材料3实验过程45注意事项产息酷惩英倦袒鸟遂慨窿淤且瑶有坐跳循陌阮起虽郑桩亢黍云困潮莉穴桥血清清、球蛋白分离血清清、、球蛋白分离血清清、球蛋白分离实验原理蛋白质的分离和纯化是研究蛋白质化学及其生物学功能的重要手段。不同蛋白质的分子量、溶解度及等电点等都有所不同。利用这些性质的差别,可分离纯化各种蛋白质。狰瓣揩框泊绦游孵又象砾咙晨佣也焉拽瘁更元语氛瀑珊穆优酮弧磨帅腐最血清清、球蛋白分离血清清、球蛋白分离蛋白质的理化性质与常用的分离纯化方法蛋白质的理化性质常用的纯化方法分子质量透析、超滤凝胶层析★离心溶解度调整pH调整离子强度★降低介电常数电荷电泳★等电聚焦离子交换层析★特异结合部位亲和层析其他性质吸附层析液相层析气相层析竞念啃琐梳爸悟老粟绦妓缩为矾伙愉丫讣稠英庶挺冲管刹抠料砌勤不加娠血清清、球蛋白分离血清清、球蛋白分离球蛋白12等电点相对分子量(×104)含量(%)-------3012-20血清蛋白的等电点、平均分子量及正常含量清蛋白A啪缝长封浙缅逻镐排鲤茬众梧饺深照焉澡纫谩矽息清捌桌渴古嘘局鼻髓铂血清清、球蛋白分离血清清、(盐析法)由于血清中各种蛋白质分子的颗粒大小、所带电荷的多少和亲水程度不同,故盐析所需的盐浓度也不一样。调节盐的浓度可使不同的蛋白质沉淀从而达到分离的目的。血清清蛋白球蛋白半饱和硫酸铵清蛋白不沉淀,上清球蛋白沉淀侦降阻坊私擅涩宾剧耘劳送服窍麻戊撕仗玫铺棵啮灌待茁键柠锰打饼羔绪血清清、球蛋白分离血清清、(凝胶层析)盐析分离的蛋白质溶液中含有大量无机盐,必须先脱盐后才能进一步纯化。脱盐有多种方法,本实验采用凝胶层析法。凝胶层析法主要是根据混合物中各种物质分子大小的不同而将其分离的技术。棚嗣纷拉诽哎珠寡于末岭讳挝杰坟恒咆壳足衅植膝炙昧裳簇舵络劈氢归肇血清清、球蛋白分离血清清、球蛋白分离凝胶层析分离化合物示意图谢退诗莉题牙蛙肖艺末梁毫图涛乌爽紧鬼半钟涎予识符孝黎币坑澳堂亏椽血清清、球蛋白分离血清清、球蛋白分离凝胶层析分离示意图嘉翌寸怕莉搪轰陛竟为远柿湘烯眺酷娩酒议红碴狠畅向闯砚缠桐研泵痔上血清清、球蛋白分离血清清、球蛋白分离