基于滚环DNA扩增和纳米金的生物传感技术研究.pdf

生物传感技术研究基于滚环┰龊湍擅捉鸬湖南大学博士学位论文学校代号:学密级:学位申请人姓名:导师姓名及职称:培养单位:专名称:论文提交日期:论文答辩日期:答辩委员会主席:号:业
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导师签名:喧馁湖南大学作者签名:面丽娟学位论文原创性声明作者签名:欧顽嫣¨日学位论文版权使用授权书日期:如年‘月‘月多月本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位本学位论文属于⒈C芸冢年解密后适用本授权书。⒉槐C芑亍朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉埃年日期:论文。
摘要性的定性或定量方法,以便更好地满足研究和实际应用的需要。针对上述问题,种新型的高灵敏性的检测蛋白质的电化学适体传感器,并实现了对模型蛋白一血小板源包埋的铩=幼偶尤牍龌防┰龇从ψ榉纸蠷反应,随后加入生物素近年来新的分子生物学技术不断涌现,并在科学研究和实际应用中得到不断的发展和完善,使生物分子检测的灵敏度和特异性都得到很大的提高。但随着疾病诊断水平的不断提高和科学研究的不断深入,对生物分子检测方法的要求也越来越高。因此,我们迫切需要开发一些高灵敏性、高特异性、高通量性和高准确本论文在蛋白质和核酸的分析和检测方面发展了一系列新的高灵敏性的生物传感技术,并通过分析实际样品以及对照经典的检测方法,初步验证了这些技术的可行性、可靠性及准确性。怂崾侍澹峭ü逋馍秆〖际醮庸押塑账峥庵兴婊秆〕龅囊欢味痰与特定的目标分子具有高亲和力和高特异性的寡核苷酸探针。在第拢颐抢用核酸适体可与抗体相媲美的特点,基于滚环┰黾际,,·将带有锏腜瓸怂崾侍辶釉诮鸬缂上。,接着利用生物素标记的探针捕获扩增产物,,结合酶的生物催化银沉积反应放大分析信号,,动态响应范围宽达鍪考叮,检测下限可达,比文献所报道的高数量级。,但是到目前为止,已经筛选出的核酸适体种类有限,不能满足大量蛋白质检测的需要,且核酸适体在蛋白质表面的非特异性吸附会产生一定的背景干扰。第轮校颐窃诖耸笛榈幕∩希弥侍灏馜技术和滚环扩增技术,构建了一种超灵敏性的免疫分析方法用于前列腺特异性抗原检测。首先将固逦皆谖⒖装迳希庖呒行姆从螅ū砻姘涣薖抗体,里面包埋了锏闹侍骞潭ㄔ谖⒖装迳希缓笕芙庵侍澹头牌淠标记的探针和荧光素标记的探针与扩增产物杂交,再用亲和素标记的微珠捕获反应产物,最后检测荧光信号。由于该方法结合了脂质体包埋引物探针和讲到博士学位论文
定盐离子浓度下发生团聚,颜色由红色变成蓝色。结果表明,,检测下限为山。同时,该方法还具有高的选择保护技术,发展了一种高灵敏性的检测模型分析物一叶酸结合蛋白的光学生物传片段,接着在核酸外切酶作用下降解纳米金上修饰的残余的单链沟非标记纳米金比色传感技术用于检测银离子矿N轆矿存在时,富次皆谀子浓度下保护纳米金不团聚,溶液呈红色。当蟠嬖谑保籧链通过瓵配关键词:生物传感器;免疫传感器;滚环┰觯坏鞍字剩荒擅捉穑恢侍放大反应,分析的灵敏度得到了显著的提高,响应动态范围从/到/,检测下限为章中,鉴于际醯母吡槊舳龋岷虾怂嵬馇忻窱末端感技术。该方法利用叶酸与叶酸结合蛋白的特异性结合,保护叶酸标记的单链被猓魑:笮鳵反应的成环模板。当赐暾嬖谑保⒐龌稤扩增反应,随后扩增产物与探针杂交,在核酸外切酶作用下引发酶切循环放大反应,产生荧光信号。结果表明,该方法可实现对叶酸结合蛋白的高灵敏性检测,响应动态范围从,检测下限为章中,我们在上章末端保护技术的基础上,基于核酸外切酶端保护技术和纳米金凝聚变色效应,提出了一种新型、快速、简便、灵敏的比色传感策略用于序列特异性岷系鞍椎募觳狻J紫仁前心勘杲岷系鞍椎慕岷闲蛄械互补金标探针杂交形成纳米金团聚体,溶液呈紫色。目标结合蛋白存在时,与其特定结合序列的特异性结合,保护纳米金团聚体不被猓芤罕3肿仙ú槐洹5目标结合蛋白不存在时,釪双链,释放