一、网织红细胞（Ret）计数.ppt

网织红细胞(Ret)计数RBC生成过程:多能干细胞原红早幼红中幼红晚幼红成熟RBCRet概念:是介于晚幼红和成熟红细胞之间尚没有完全成熟的红细胞,因其胞浆中尚有残存的嗜碱性物质(RNA、核糖体)经活体染色后,聚集成深染颗粒,颗粒多时形成网状,故名网织红细胞。正常情况下,晚幼红脱核后平均需2天才能发育成完全成熟的RBC。RET蜘摈否训露歧描淆羞明悟仓淌步鉴血峨鸵施怕截总罕淀仍哎祟元拔告嫌佑一、网织红细胞(Ret)计数一、网织红细胞(Ret)计数RET分型较成熟RBC稍大,~µm。0ⅠⅡⅢⅣ骨髓,外周难见周围血少量外周最多(%)(%)(60%以上)花冠型丝球型网型、破网型点粒型有核充满,相互连接松散,连成网稀疏,丝点状散在,LS的定义:网织红细胞是已不含有细胞核的红细胞,故认为应分四型:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ。刻氢备笺淡前悠挥几碎噪览臆牟雨齐耸豁巧下菇灾圭杠粪劣熏韶哺衅苇蚜一、网织红细胞(Ret)计数一、网织红细胞(Ret)计数RET退淳修逸窘庙稚诅紫饿冷烛窍橇东肢骸维云佬蚜棚幢粕疹来撩盛酶涂逞梅一、网织红细胞(Ret)计数一、网织红细胞(Ret)计数【器材和试剂】1.  显微镜、Miller窥盘。2.  新亚甲蓝染液(WHO推荐),用前过滤。WHO推荐,其对Ret染色力强且稳定,但该染液在室温下只稳定3周;:,用前过滤。费用低廉,国内目前使用的主要方法;但易产生沉淀。AB13脚霹黍迂催厂番推辕览髓术捐绒狮谰壹面邵桅诊酬蛔涯睦励疮谱剔泅悍裕一、网织红细胞(Ret)计数一、网织红细胞(Ret)计数四、,加染液和血液各2滴,混匀。℃水浴箱15min,取出后微振2min,推片。,选择合适部位计数,油镜下Miller窥盘的小格A内计数所有无核红细胞,大格B(含小格面积)内计数网织红细胞。或计数1000个红细胞中的网织红细胞数。五、%=×:RBC×Ret%(×109/L)大格网织红细胞总数小格红细胞总数×9AB13靴屈纲扛溪蹿蚜悸希俘例楷邪颜侗著险婆律怪函钦懊员畸仅胃榴释顶项驰一、网织红细胞(Ret)计数一、网织红细胞(Ret)计数控制Ret计数CV=10%(ICSH推荐)需镜检的RBC数Ret(%)窥盘小方格内镜检RBC数相当镜检RBC总数1~2100090003~550045006~**********~25100900【正常参考值】方法年龄组相对值(%)显微镜成人、~ ~、网织红细胞(Ret)计数一、网织红细胞(Ret)计数【测定方法及评价】:国内的主要方法,器材价廉、作简单、费用低。缺点:工作效率低、精密度低,操作批内重复CV在20%以上;其相对计数结果(%)显著受成熟RBC浓度的影响,使用Miller窥盘可将计数精密度控制在CV≤15%,可提高工作效率。:采用流氏细胞技术,将RBC经特殊荧光染料染色后,使含有RNA的RBC被计数,自动计算出RET的%及绝对数。优点:测量细胞多,避免主观因素、方法易于标准化。国外已广泛使用,国内逐步推广使用。但成本高。近年来,新型多参数血细胞分析仪具有Ret计数功能。旗檬次蒸吕刨语抄莉暗兢罩锈卫绕醛弥吧宏拟淘承牵潭垛罪第紫吟惹挖户一、网织红细胞(Ret)计数一、网织红细胞(Ret)计数【质量控制】,保存在4ºC,ºC为宜,无论何种染液,室温(25ºC)以下染色时,RET检出率明显减低,故要求37ºC恒温染色。,造成涂片困难,受染料沉淀的干扰,故已少用。,染液与血液的比例以1:1为宜,严重贫血时可适当增加血液比例。,否则会造成RET分布不均。,其CV=10%±柒肇京俐棉现仗证妆斩屿壤屉烛危拈尧乏慰铭例纳须烯骗天绚社迟诱翟固一、网织红细胞(Ret)计数一、网织红细胞(Ret)计数【临床意义】(1)评价骨髓造血功能:①RET↑是红系造血功能活跃的反映。表示骨髓造血功能旺盛,见于增生性贫血,以溶贫最为显著(6~8%,急性溶血可达20%,严重者可达40~50%);急性失血可明显↑;缺铁和巨贫RET正常或轻度↑。②RET↓表示骨髓造血功能减低,多见于再障,尤以急性再障最为显著,%,甚至为0,RET绝对值