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广州医学院
硕士学位论文
载NGF的PLGA纳米粒制备工艺的优化及特性研究
姓名:梅林
申请学位级别:硕士
专业:人体解剖学与组织胚胎学
指导教师:龙大宏
20100501
广州医学院硕士学位论文载 NGF 的 PLGA 纳米粒制备工艺的优化及特性研究
载 NGF 的 PLGA 纳米粒制备工艺的优化
及特性研究

硕士研究生: 梅林
导师: 龙大宏教授
广州医学院人体解剖学教研室
中文摘要
随着全球人口老龄化,中枢神经系统(Central nervous system, CNS)疾病越
来越受到人们的重视。阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)是一种认知及记
忆功能进行性减退为临床表现的中枢神经系统退行性疾病。目前对 AD 的发病机
制尚不清楚,而且治疗手段非常有限,效果也不甚理想。目前临床治疗主要依靠
胆碱酯酶抑制剂、NMDA 受体拮抗剂以及各种改善脑循环药物。但这些药物仅能
减缓病情的进程,而无法阻止或扭转疾病的发展。实验室研究发现,神经营养因
子类药物能有效阻止病情恶化,改善 AD 症状。
神经生长因子(Nerve growth factor, NGF)是一种具有高度生物活性的蛋白
质,其受体普遍存在于人体中枢和外周神经系统的各种神经元中。NGF 的主要作
用是营养和保护神经细胞,恢复受损神经细胞,并能促进神经生长。动物研究发
现其对治疗老年痴呆方面也具有明显改善症状的效果。此外,不同种属的动物体
中分离出的 NGF 具有高度同源性,动物源性的 NGF 同样适合人类使用,因此 NGF
S 疾病最有潜力的药物之一。
但是,由于血脑屏障的存在使得 NGF 在临床应用中受到很大限制。早期临床
治疗当中采取的脑室内注射的给药方式虽然有效,但势必会增加病人的痛苦和感
染风险。而且由于 NGF 半衰期短、以及脑脊液回流等原因,致使药物很难在脑内
保持有效浓度,药物利用率非常低。因此寻找一种技术来提高血脑屏障对 NGF
的通透性,增加 NGF 在脑内作用的持久性是 NGF 成功用于临床治疗的关键。
近年来,随着纳米医药技术的发展,不断有文章报导利用纳米药物载体能够
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广州医学院硕士学位论文载 NGF 的 PLGA 纳米粒制备工艺的优化及特性研究
携带药物穿透血脑屏障作用于脑内,为 NGF S 疾病带来了新的方向。而
且 2005 年美国 FDA 批准白蛋白结合紫杉醇纳米粒注射混悬液(Paclitaxel,
ABRAXANE)上市,说明纳米药物载体的安全性是有保障的。因此,可以设想
将 NGF 制备成缓释纳米粒来解决 NGF S 疾病给药难的问题。
本论文以牛血清蛋白(Albumin, BSA)和NGF为模型药物,以聚乳酸-聚羟基
乙酸共聚物[Poly(lactic-co-glycolic acid), PLGA]为药物载体,采用复乳化溶剂挥发
法制备包裹牛血清蛋白的聚乳酸-聚羟基乙酸纳米粒(BSA-PLGA-NPs)和包裹神
经生长因子的聚乳酸-聚羟基乙酸纳米粒(NGF-PLGA-NPs),通过纳米粒度分析
仪测量整体平均粒径及其分布,用扫描电镜观察表面形态,用BCA法和ELISA法
测定包封率,并利用正交试验设计优化制备工艺,并对两种纳米粒的药物释放行
为进行研究和比较,最终建立了适合本实验室的纳米药物载体制备工艺。

结论:
1. 单因素分析显示 PVA 浓度增高,BSA-PLGA-NPs 的平均粒径减小;超声时
间延长,平均粒径减小;PLGA 用量增大,平均粒径增大;BSA 用量和内水
相体积对平均粒径没有明显影响。
2. 正交试验设计及方差分析显示,PVA 浓度和超声时间对平均粒径的影响并
不显著,但对包封率有显著影响,PVA 浓度增高,包封率增大;超声时间延
长,包封率也增大。但 PLGA 的用量对粒径和包封率都有显著影响,用量增
大则粒径增大,包封率增高。为了在粒径更小的基础上获得包封率更大的纳米
粒,最终确认的优化处方为 PVA 浓度 %,超声时间 20 min,PLGA 用量
25 mg。
3. 以优化处方为标准,制备了 BSA-PLGA-NPs 的平均粒径最小为 219 nm,包
封率为 %。而以优化处方制备的 NGF-PLGA-NPs 的平均粒径最小为 243
nm,包封率为 %。说明以 PLGA 为材料可制备出平均粒径小于 300 nm,
包封率大于 40 %的蛋白质多肽纳米载药系统。也说明以 BSA 为模型药物来探
索 NGF 纳米粒的制备工艺的实