高中生物选修三知识点归纳.doc

高中生物选修三知识点归纳.DOC:..高中生物选修三知识点归纳专题1基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋「生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因匸程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,乂叫做DNA重组技术。1•“分子于•术刀”——限制性核酸内切酶邙艮制酶)(1)(2)(-)基因工程的基本工具来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。功能:能够识别双链DNA分子的某种睦定的核芹酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核背酸之间的磷酸二酯键断开,因此貝-有专一性。(3)2.“分子缝合针”结果:经限制酶切割产牛的D\A片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。DNA连接酶⑴两种DNA连接酶(DNA连接酶和DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合磷酸二酯键。②区别:DNA连接酶来源于h噬菌体,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而「DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。(2)与DNA聚合陆作用的界同:DNA聚合輛只能将单个核昔加到已有的核昔酸片段的末端,载体具备的条件:①能在受体细,中复制并稳定保存。形成磷酸一酯键。DM连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸一酯键。限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分了片段脱氧核廿酸DNA分了作用部位磷酸一•酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键作用结果形成粘性末端或平末端形成重组DNA分子形成新的DNA分子形成单链DNA分子⑶与DNA分子相关的酶3.“分子运输乍”——载体(1)②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。(2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。其它载体:噬菌体的衍生物、动植物病毒(-)基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取「从基因文库屮获取1、获取目的基因的方法*冈枪法J人工合成提取目的基因的途径/ f V从供体细胞的DNA中直接分离基因方法:鸟枪法人工合成基因(真核细胞)/ " 、反转录法 扌鵬己知氨基酸序合如A③木鵬己知氨基酸序列合成DNA的过程:①鸟枪法的过程:供体细胞中DNA[限制鸽许多DNA片段]载入运上体[导入受懺田胞*卜源DNA扩増产生特定性状[分离目蟲S②反转录法的过程:目的基因的jnRNA]反转录单链DNA[合成双链DNA(即目的基因)蛋白质的氨基酸序列I推测mRNA的核昔酸序列I推测结构基因的核昔酸序列[:编码蛋白质的结构基因°,真核基因是人工合成。人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法、(1) 原理:DNA双链复制(2) 过程:第一步:加热至90〜95°CDNA解链:第二步:冷却到55〜60°C,引物结合到互补DNA链:笫三步:加热至70〜75°C,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步::使口的基因在受体细胞屮稳定存在,并「L可以遗传至下一代,使R的基因能够表达和发挥作用。:目的基因+启动子+终止子+标记基因(1) 启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录岀mRNA,绘终获得所盂的蛋白质。(2) 终上子:也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的Mo(3) 标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。3、目的基因与运载体结合(以质粒为运载体)DNA分子种限制酶处理两个is*端两个切口茯得目的基因DNAS接酶重组DNA分子懂组质粒)第三步:::是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是一农杆菌转化法,其次还有-基因枪法和花粉管通道法等。将H的基因导入动物细胞:最常川的方法是-显微注射技术。此方法的受体细胞多是-受精卵。将n的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,最常用的原核细胞是大肠杆菌,其转化方法是:先用处理细胞,便其成为感受态细胞,再将重组表达载体DNA分子溶丁缓冲液中■感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程。