艾德KRAS试剂盒说明书.docx

【产品名称】通用名称:人类 KRAS 基因 7 种突变检测试剂盒(荧光 PCR 法)英文名称:Human KRAS Gene 7 Mutations Fluorescence Polymerase ChainReaction (PCR) Diagnostic Kit【包装规格】12 测试/盒【预期用途】KRAS 基因是人体肿瘤中常见的致癌基因。该基因的突变常见于多种恶性肿瘤,在肺癌患者中的突变率为 15~30%,在结直肠癌患者中的突变率为 20~50%。导致 KRAS 处于激活状态的突变主要位于第 12 和 13 密码子上。KRAS 基因突变一般会使肺癌患者对 EGFR 酪氨酸激酶抑制剂产生耐药,使结直肠癌患者对抗 EGFR 抗体类药物产生耐药。但是,2010 年 10月的最新研究发现第 13 密码子上的 Gly13Asp(G13D)突变亦对抗 EGFR 抗体类药物有治疗反应性(参见:De Roock. W. JAMA. 2010;304(16):1812-1820)。因此,KRAS 基因突变检测能提高肿瘤临床治疗的针对性,降低治疗费用,节省宝贵的治疗时间。大部分肿瘤的突变都是体细胞突变,突变细胞往往与野生型细胞混杂在一起,因此所提取的 DNA 常带有大量野生型 DNA,所以对体细胞突变检测需要较高的特异性,而目前广泛使用的直接测序法检测能力有限,不能完全满足临床需要。本试剂盒用于检测人类 KRAS 基因的 12 和 13 密码子上 7 种热点体细胞突变(见表 1),试剂盒以 DNA 为检测样本,提供突变状态的定性评估。辅助临床医生筛选出可受益于肿瘤靶向药物的大肠癌等癌症患者。该产品用于组织中提取 DNA 的 KRAS 基因 7 种突变的检测,为临床医生对大肠癌或肺癌患者选择肿瘤靶向药物治疗提供参考。表 1 人类 KRAS 基因的 12 和 13 密码子上 7 种热点体细胞突变 突变名称 氨基酸变化 碱基变化 Cosmic ID 公司命名 Gly12Asp 甘氨酸到天门冬氨酸 GGT>GAT 521 12-2-A Gly12Ala甘氨酸到丙氨酸 GGT>GCT 522 12-2-C Gly12Val 甘氨酸到缬氨酸 GGT>GTT 520 12-2-TGly12Ser 甘氨酸到丝氨酸 GGT>AGT 517 12-1-A Gly12Arg 甘氨酸到精氨酸 GGT>CGT 51812-1-C Gly12Cys 甘氨酸到胱氨酸 GGT>TGT 516 12-1-T Gly13Asp甘氨酸到天门冬氨酸GGC>GAC 53213-2-A【检测原理】本试剂盒基于实时 PCR 平台结合了特异引物和双环探针两种技术,检测 DNA 样品中含有的突变基因。利用特异引物对突变靶序列进行高精准 PCR 扩增放大,与此同时,利用双环探针对扩增产物进行检测,结合特别的 PCR 反应程序和高特异 Taq 酶的使用,在实时 PCR平台上实现对样品 DNA 中突变的检测,以达到对稀有突变检测的高特异性和高灵敏度,即高的选择能力。【主要组成成份】试剂盒采用 8 联 PCR 管设计,每一个 8 联 PCR 管检测一个样品,8 联管的 1-7(或 A-G,或8 联 PCR 管两端各有一个小孔,小孔居侧端为 1 号管,小孔居中端为 8 号管)管内装有相应的 KRAS 基因 7 种突变检测和