艾德KRAS试剂盒说明书.docx

【产品名称】通用名称:人类KRAS基因7种突变检测试剂盒(荧光PCR法)英文名称:HumanKRASGene7MutationsFluorescencePolymeraseChainReaction(PCR)DiagnosticKit【包装规格】12测试/盒【预期用途】KRAS基因是人体肿瘤中常见的致癌基因。该基因的突变常见于多种恶性肿瘤,在肺癌患者中的突变率为15~30%,在结直肠癌患者中的突变率为20~50%。导致KRAS处于激活状态的突变主要位于第12和13密码子上。KRAS基因突变一般会使肺癌患者对EGFR酪氨酸激酶抑制剂产生耐药,使结直肠癌患者对抗EGFR抗体类药物产生耐药。但是,2010年10月的最新研究发现第13密码子上的Gly13Asp(G13D)突变亦对抗EGFR抗体类药物有治疗反应性(参见:;304(16):1812-1820)。因此,KRAS基因突变检测能提高肿瘤临床治疗的针对性,降低治疗费用,节省宝贵的治疗时间。大部分肿瘤的突变都是体细胞突变,突变细胞往往与野生型细胞混杂在一起,因此所提取的DNA常带有大量野生型DNA,所以对体细胞突变检测需要较高的特异性,而目前广泛使用的直接测序法检测能力有限,不能完全满足临床需要。本试剂盒用于检测人类KRAS基因的12和13密码子上7种热点体细胞突变(见表1),试剂盒以DNA为检测样本,提供突变状态的定性评估。辅助临床医生筛选出可受益于肿瘤靶向药物的大肠癌等癌症患者。该产品用于组织中提取DNA的KRAS基因7种突变的检测,为临床医生对大肠癌或肺癌患者选择肿瘤靶向药物治疗提供参考。表1人类KRAS基因的12和13密码子上7种热点体细胞突变突变名称氨基酸变化碱基变化CosmicID公司命名Gly12Asp甘氨酸到天门冬氨酸GGT>GAT52112-2-AGly12Ala甘氨酸到丙氨酸GGT>GCT52212-2-CGly12Val甘氨酸到缬氨酸GGT>GTT52012-2-TGly12Ser甘氨酸到丝氨酸GGT>AGT51712-1-AGly12Arg甘氨酸到精氨酸GGT>CGT51812-1-CGly12Cys甘氨酸到胱氨酸GGT>TGT51612-1-TGly13Asp甘氨酸到天门冬氨酸GGC>GAC53213-2-A【检测原理】本试剂盒基于实时PCR平台结合了特异引物和双环探针两种技术,检测DNA样品中含有的突变基因。利用特异引物对突变靶序列进行高精准PCR扩增放大,与此同时,利用双环探针对扩增产物进行检测,结合特别的PCR反应程序和高特异Taq酶的使用,在实时PCR平台上实现对样品DNA中突变的检测,以达到对稀有突变检测的高特异性和高灵敏度,即高的选择能力。【主要组成成份】试剂盒采用8联PCR管设计,每一个8联PCR管检测一个样品,8联管的1-7(或A-G,或8联PCR管两端各有一个小孔,小孔居侧端为1号管,小孔居中端为8号管)管内装有相应的KRAS基因7种突变检测和内控试剂,突变由FAM信号指示,内控由HEX(或VIC)信号指示;8(或H)号管作为DNA提取质量的外控检测管,亦由FAM信号指示,内控和外控作为对试剂、DNA质量以及操作本身的质控,选择的检测区域是人类KRAS基因相对保守的区段,约100bp,这样即便DNA有降解,外控和内控仍然能够