免疫酶斑点试验免疫酶斑点试验Dot-:。。。免疫酶斑点技术的原理硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜具有很强的静电吸附力,在中性条件下即可有效地吸附蛋白质等生物大分子。将免疫物质吸附于纤维素膜后,则可利用纤维素膜作为固相进行抗原抗体反应。-Ab反应,具有高特异性;,具有高敏感性;(1)微量抗原的检测(2)抗体分泌细胞、细胞因子产生细胞的筛选(3)自身抗体的检查一、实验内容免疫酶斑点试验检测微量人IgG二、实验材料Ag:人IgG阴性对照:NS酶标记抗体:羊抗人IgG酶:辣根过氧化物酶(HRP)底物:邻苯二胺(OPD)封闭液:5%脱脂奶粉洗涤液:磷酸盐缓冲液;三、实验方法(直接法),待干后用笔做好标记;-10μl和NS分别加于相应格内,室温自然干燥!(用震荡器);,每次1分钟,最后1次吸干;,震荡15分钟,(用震荡器);,震荡洗涤3次,每次1分钟,最后1次吸干;,震荡15分钟左右观察结果(用震荡器)。结果判断无色为阴性;明显棕色斑点为阳性。
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