海水中菌落总数方法确认材料.doc

1海水中细菌总数的测定平板计数法测定方法验证报告(-2007海洋监测规范第7部分:近海生态调查和生物监测),确认实验室在人、机、料、法、环等方面是否都达到标准要求,实验室是否具备开展用平板计数法测定海水中细菌总数的检测能力。。本标准适用于近海中细菌总数的测定。,确保测量过程正常进行,消除各种可能影响试验结果的意外因素。。。:平板计数法是根据单一的细菌在平板培养基上,经若干时间培养,形成一个肉眼可见的子细胞群(菌落),通过计算菌落数而得之细菌数。菌落计数方法:1、当平皿上出现较大片菌苔时,不应计数。22、选择菌落数在30个∽300个之间的平皿,以平均菌落数乘以稀释倍数,即为该水样的细菌数。3、若有两稀释度的平均菌落数均在30个∽300个之间,则应按两者菌落数之比值决定,比值小于2,取两者的平均数,若大于2,取其较少的菌落数。4、若所有稀释度中各个不同稀释度的平均菌落数均大于300,则以稀释度最高的(浓度最低)的平均菌落数乘以稀释倍数。5、若所有稀释度中各个不同稀释度的平均菌落数均小于30,则用稀释度最低的(浓度最高)平均菌落数乘以其稀释倍数。6、若所有稀释度都没有长出菌落,同事也没坚持抑制物,则报告小于1乘以其最低稀释倍数。:氢氧化钠溶液(160g/L):称取氢氧化钠16g,溶于100mL的蒸馏水中。吐温溶液(1+2000):取1mL吐温80,溶于2000mL的蒸馏水中。:2216E培养基(本培养基由青岛高科园海博生物技术有限公司提供)主要成分(g/L):,将上述成分加热溶解,用氢氧化钠溶液(160g/L),置于高压蒸汽灭菌器中,在121℃下灭菌20min,将此培养基分别倒入经灭菌的平皿中,每皿约15mL,待其冷却凝固,置冰箱内保存备用。,按100mL水样加1mL吐温溶液,充分摇匀,使样品中的细菌细胞分散成单一细胞。以无菌操作法吸取1mL水样注入盛有9mL灭菌陈海水的试管内混匀,并依同法依