麻黄细辛附子汤抗肾阳虚外感的血清代谢组学研究.doc

麻黄细辛附子汤抗肾阳虚外感的血清代谢组学研究[摘要]目的:运用代谢组学方法研究麻黄细辛附子汤对苯甲酸雌二醇诱导的肾阳虚外感小鼠血清中内源性代谢物的作用机制。方法:采用HPLC-TOF/MS测定分析小鼠血清代谢物谱,应用偏最小二乘判别分析法研究对照组和模型组之间的代谢物差异,并采用SIMCA-,研究MXF对小鼠肾阳虚外感证的干预效果。结果:麻黄细辛附子汤水煎液能明显使小鼠血清中代谢物出现恢复正常的作用趋势。结论:代谢组学研究能较全面地反应生物体的生理及代谢状态,为中医证的本质研究及药物药效评价提供了一种新方法。[关键词]代谢组学;麻黄细辛附子汤;肾阳虚外感;HPLC-TOF/MS英文翻译:“麻黄细辛附子汤”是来源于张仲景《伤寒论》的经方,主要用来治疗阳虚兼外感的病证。方中由麻黄、细辛、炮附子三味药组成,麻黄发汗解表,附子温里助阳,细辛温化寒饮,既助麻黄解表,又配合附子逐里之寒饮。本方具有助阳解表、温经散寒之功效,组方严谨,用于治疗素体阳虚,复感寒邪,恶寒发热,寒重热轻,头痛无汗,四肢欠温,舌质淡,苔薄白,脉沉细[1]。流行性感冒是由流感病毒引起的上呼吸道病毒感染性疾病,是人类最常见的上呼吸道感染性疾病之一[2]。代谢组学的定义为对生物系统因病理生理或基因改变等刺激所致动态多参数代谢应答的定量测定[3],,所反映的是人体生化网络对所有扰动因素进行应答和变化的终端信息,与中医证的内涵比较接近,有可能为揭开证提供客观依据[4]。本研究探讨麻黄细辛附子汤(MXF)对苯甲酸雌二醇诱导的小鼠肾阳虚外感证作用的血清代谢物变化规律以及对相关潜在血清中内源性代谢标志物的干预作用,来探究中药复方对肾阳虚且感染流感病毒的作用,对阐明中药的有效性、探求中药的物质基础和作用机制等都具有重要意义。,SPF级,雄性,体重18~22g,山东鲁抗动物实验中心提供,许可证号SCXK(鲁)20080002。(美国安捷伦公司,配有在线脱气机、四元泵、自动进样器、柱温箱和二极管阵列检测器);Agilent6230TOF质谱仪(美国安捷伦公司,配有标准电喷雾离子源、MassHunterDataAcquisition在线工作站和QualiativeAnalysis离线分析软件);SIGMA低速冷冻离心机(D-37520);高速离心机(厂家型号);涡旋仪(厂家型号);电子天平(上海精密科学仪器有限公司)。苯甲酸雌二醇注射液(上海通用药业股份有限公司,批号:100801);乙腈(级别,厂家);甲酸(级别,厂家);水(娃哈哈纯净水)。、细辛(购于济南建联中药店,批号:20110212;由山东中医药大学中药鉴定教研室李峰教授鉴定为辽宁宽店细辛);黑附片(购自安徽亳州中药饮片厂,批号:20120710);,细辛3g,炮附子9g;药材先浸泡1h,第1煎加8倍量的蒸馏水,煎煮2h,第2煎再加8倍量的蒸馏水,,过滤,合并滤液,·mL-1,其余所需浓度稀释即得,4℃保存[5]。,适应性喂养2天后随机分为正常对照组和模型组和MXF模型给药组(其中正常对照组10只,模型组1