乳铁蛋白定量检测试剂盒说明书.doc

产品说明书乳铁蛋白定量检测操作简要说明书一、试剂盒的组成1、酶标板1块 ………………………………………………………………………………………………………………96孔2、标准液×5瓶:(1ml/瓶)0ppm,,,,、抗体工作液………………………………………………………………………………………………………………7ml/瓶4、酶标二抗…………………………………………………………………………………………………………………12ml/瓶5、20×浓缩洗涤液…………………………………………………………………………………………………………40ml/瓶6、复溶工作液………………………………………………………………………………………………………………50ml/瓶7、底物液A液………………………………………………………………………………………………………………7ml/瓶8、底物液B液………………………………………………………………………………………………………………7ml/瓶9、终止液……………………………………………………………………………………………………………………7ml/瓶二、配液方法配液1:洗涤液工作液将洗涤浓缩液与去离子水按1:19体积比按照需要量进行稀释(1份浓缩洗涤液+19份去离子水)。三、样本前处理步骤┅┅,用力摇匀。();┅┅取上述溶液按照1:199体积比用复溶液进行稀释(5l样品溶液+995l复溶液),用涡旋仪涡动2min;┅┅取50l用于分析。四、操作步骤1、使用前准备用前请将试剂盒从4℃冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30min以上,使其温度回升到室温(20-25℃)。2、取预包被的微孔条板(根据样本量,可拆开分次使用),将多余的微孔板条放入自封袋,避光保存于2~8℃环境,不要冷冻。3、编号:将样本和标准品按序编号,样本和标准品均需做双孔。4、加标准品/样本:加标准品/样品各50l,加入抗体工作液50l,轻轻振荡摇匀,盖上盖板膜置37℃避光环境反应30min。5、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液(见配液1)250l/孔,充分洗涤4—5次,每次间隔10s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。6、加酶标二抗:加入酶标二抗工作液100l/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置37℃避光环境中反应30min。7、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤工作液(见配液1)250l/孔,充分洗涤4—5次,每次间隔10s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。8、显色:每孔加入底物液A液50l,再加入底物液B液50l,轻轻振荡摇匀,盖上盖板膜置37℃避光环境显色15min。9、测定:每孔加入终止液50l,轻轻振荡摇匀,设酶标仪波长于450nm处(建议使用双波长450/630nm)检测请在5min内读取数据,测定每孔吸光度值(OD值)。五、结果判定结果判定有两种方法,粗略判定可用第1种方法,定量判定用第2种方法。注意样本吸光值与乳铁蛋白的含量成负相关。1、用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围(ppm)。,样本2的吸光度值为1.