一、概况1911年Rous和Murphy首先应用鸡胚培养研究肉瘤病毒(Rous肉瘤)的繁殖。等应用鸡胚繁殖病毒、Cox应用卵黄囊培养立克次体。鸡胚培养法的优点:鸡胚的组织分化程度低,可选择适当途径接种,病毒易复制,感染病毒的膜和液体含大量病毒。鸡胚是一整体,有神经血管的分布及脏器的构造。来源充足,操作简单,通常是无菌的,对接种的病毒不产生抗体。鸡胚培养法的缺点:一般的病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征。卵黄中常常含有抗家禽病原体的母体抗体。某些细菌、衣原体和病毒能够从感染的母鸡传递到鸡胚。通常鸡胚含有白血病病毒。在鸡食物中加入抗菌素,母鸡吃后会传递给鸡胚,鸡胚就会产生对立克次体和衣原体感染的抵抗。第一节鸡胚的结构与生理鸡胚是由三个胚层发育起来的,即外胚层、中胚层和内胚层,它们构成胚胎的组织与器官。(约10日龄鸡胚的结构见图)尿囊腔位于绒毛尿囊腔和羊膜之间,胚胎排泄器官含5-20ml尿囊液,含大量的尿酸盐,为减少沉淀,盐水稀释再4℃保存。卵黄囊主要营养的储藏场所,为胚胎提供营养。卵白外于卵的锐端,为胚胎发育晚期提供营养。第二节鸡胚的孵育和检查受精鸡卵的供给—没有受到病毒和细菌的污染如新城鸡瘟病毒、布氏杆菌等;—培养立克次体和衣原体,不能来自食用抗生素的鸡群。鸡胚的孵育—温度为38~39℃;—湿度为40%-70%;—翻蛋:防止蛋白粘连,促进羊膜运动和空气流通;—通风:排出CO2和吸入O2。检卵—血管:活胚可见清晰的血管,有时可见血管搏动,死胚血管模糊成淤血带或淤血块。—胎动:活胚可见明显的自然运动,尤其在转动胚胎时,死胚见不到任何胎动,胚胎发红像出血样,有的呈现黑块。—绒毛尿囊膜发育界限:发育好的鸡胚可见密布丰满的血管网,也就是绒毛尿囊膜,死胚则见不到这一现象。
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