干细胞诱导、细胞系诱导和原代分离3种提取成骨细胞的方法比较.doc

中国组织工程研究第21卷第17期2017–06–18出版ChineseJournalofTissueEngineeringResearchJune18,,-21-1581/RCODEN:ZLKHAH2729·研究原著·,女,1993年生,四川省自贡市人,汉族,2016年华中科技大学毕业,主要从事椎间盘退变机制和椎间盘组织工程研究。通讯作者:郑东,博士,副教授,副主任医师,华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市430000中图分类号::B文章编号:2095-4344(2017)17-02729-06稿件接受:2017-05-05DengXiang-yu,DepartmentofOrthopedics,WuhanUnionHospital,TongjiMedicalCollege,HuangzhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430000,HubeiProvince,ChinaCorrespondingauthor:ZhengDong,.,Associateprofessor,Associatechiefphysician,DepartmentofOrthopedics,WuhanUnionHospital,TongjiMedicalCollege,HuangzhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430000,HubeiProvince,China干细胞诱导、细胞系诱导和原代分离3种提取成骨细胞的方法比较邓享誉,陈胜,邵增务,郑东(华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科,湖北省武汉市430000)引用本文:邓享誉,陈胜,邵增务,、细胞系诱导和原代分离3种提取成骨细胞的方法比较[J].中国组织工程研究,2017,21(17):2729-:.2095-:0000-0003-3250-2833(郑东)文章快速阅读:文题释义:细胞系:指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞。由此便引申出了后来的有限细胞系、无限细胞系,因此,细胞系狭义是指可连续传代的细胞,广义是指可传代的细胞。诱导分化:细胞分化是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程。细胞分化的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达,通过不同基因表达的开启或关闭,最终产生标志性蛋白质。诱导分化即人为干预或外在因素作用下,使得细胞向特定方向成熟的过程。摘要背景:成骨细胞是骨组织构建的重要组织细胞之一。成骨细胞取材困难,不同方法获得的成骨细胞纯度及钙化能力不尽相同。目的:比较小鼠骨髓间充质干细胞成骨诱导、细胞系MC3T3-E1成骨诱导和小鼠颅骨原代细胞培养3种方法获得的成骨细胞的纯度及钙化能力。方法:采用贴壁纯化法分离出小鼠骨髓间充质干细胞,传至3代后用成骨诱导培养基诱导21d;将前成骨细胞系MC3T3分别用成骨诱导培养液1和成骨诱导培养液2诱导21d;使用Ⅰ型胶原酶消化法取得乳鼠颅骨原代成骨细胞。对3种方法获得的成骨细胞进行茜素红钙结节染色,观察其成骨特性。结果与结论:①;②前成骨细胞系MC3T3诱导培养液1组可观察到稀疏的钙结节,,诱导培养液2组可观察到密集的钙结节,,两种诱导液相比钙结节形成能力差异有显著性意义(P<);③;④除MC3T3诱导液1组与原代成骨细胞相比差异无显著性意义外,其余两两相比成骨能力差异均有显著性意义(P<);⑤由于骨髓间充质干细胞分离培养具有更多不可控因素,因此MC3T3细胞用含有地塞米松的诱导培养液2进行成骨诱导方法较好。关键词:干细胞;分化;骨髓间充质干细胞;MC3T3;成骨细胞;成骨诱导;钙结节染色;吉姆萨染色;国家自然科学基金主题词:骨髓;间质干细胞;成骨细胞;组织工程基金资助:国家自然科学基金资助(81472134)Threemethodstoisolateosteoblasts:stemcellinduction,celllineinductionandprimaryisolationDengXiang-yu,ChenSheng,ShaoZeng-wu,ZhengDong(DepartmentofOrthopedics,WuhanUnionHospital,TongjiMedicalCollege,HuangzhongUniversi