菌落总数大肠菌群检验范例.doc

饼干中菌落总数与大肠菌群的测定GB/ 食品卫生微生物学检验 糖果,糕点,蜜饯检验项目指标非夹心饼干夹心饼干菌落总数/(cfu/g)≤7502000大肠菌群(MPN/100g)≤30霉菌计数/(cfu/g)≤50致病菌(沙门氏菌,志贺氏菌,金黄色葡萄球菌)不得检出  一、检测对象散装饼干,、电热干燥箱、恒温培养箱(36℃±1℃)、冰箱(2℃-5℃)、电子天平、电炉等。2用具无菌吸量管(1mL)、放大镜或菌落计数器、pH计或精密pH试纸、灭菌试管平皿(直径9cm)、刻度吸管、采样瓶、小倒管等。,采样工具和容器应无菌、干燥、防漏,形状及大小适宜。,检验前要保持包装的完整,避免污染。,用无菌采样器现场采集5倍或以上检验单位的样品,放入无菌采样容器内,采样总量应满足微生物指标检验的要求。、准确的记录和标记,采样人应清晰填写采样单(包括采样人、采样地点、时间、样品名称、来源、批号、数量、保存条件等信息)。,应将样品在接近原有贮存温度条件下尽快送往实验室检验。运输时应保持样品完整。如不能及时运送,应在接近原有贮存温度条件下贮存。:食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。2. -2010 菌落总数测定流程检样25g(mL)样品+225mL稀释液,均质↓10倍系列稀释↓选择2个~3个适宜稀释度的样品匀液,各取1mL分别加入无菌培养皿内,每皿中加入15mL~20mL平板计数琼脂,混匀↓36℃±1℃,48h±2h培养,计数各平板菌落数↓ ,按照如下公式计算:N=ΣC/[n1+(×n2)]×(d)N=样品中菌落数ΣC=平板菌落数之和n1=含合适范围菌落数的第一稀释度(低)平板数n2=含合适范围菌落数的第二稀释度(高)平板数d=第一稀释度(低)                 1000mLpH +/-,煮沸溶解,,经121℃-+,每个稀释度接种三管LST肉汤(每管9mLLST肉汤并加有导管),℃,24±2h~48±,报告阴性有产气管,接种BGLB肉汤管,36±℃,48±2h,查MPN表报告结果(大肠菌群).有产气管,接种EC肉汤,±℃(水浴培养),24±2h~48±(36℃、18~24h).从EMB平板上挑取5个可疑菌转接到PCA斜面,进行革兰氏染色、IMVC生化