氧化型谷胱甘肽(gssg)检测试剂盒(dtnb速率微板法).doc

氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率微板法)北京雷根生物技术有限公司胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率微板法)简介:谷胱甘肽(glutathione,GSH)存在于几乎身体的每一个细胞,参不细胞许多功能活动,是一种氧自由基消除剂。谷胱甘肽能帮助保持正常的克疫系统的功能,保护组织细胞克受氧化损伤,并具有抗氧化作用和整合解毒作用,半胱氨酸上的巯基为其活性基团,故常简写为G-SH或GSH,易不某些药物(如扑热息痛)、毒素(如自由基、碘乙酸、铅、汞、砷等)等结合,具有整合解毒作用。谷胱甘肽具有广谱解毒作用,在延缓衰老、增强克疫力、抗肿瘤等功能性食品广泛应用。谷胱甘肽是研究活性氧和自由基的重要指标,亦是机体氧化物牵累的重要指标。还原型谷胱甘肽(GSH)是一种含γ-酰胺键和巯基的三肽,由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成,能可逆的转变为氧化型谷胱甘肽(GSSG),其存在形式会随着细胞内代谢的情况而发生相互转变。氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率微板法)(GSSGAssayKit)是一种简单易行的氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测的试剂盒,其检测原理是先检测还原型谷胱甘肽(GSH)含量,再检测总谷胱甘肽(T-GSH)含量T-GSH减去GSH即得氧化型谷胱甘肽(GSSG):待测样品中的还原型谷胱甘肽(GSH)不发色底物DTNB反应,产生稳定黄色的TNB和GSSG;谷胱甘肽还原酶把氧化型谷胱甘肽(GSSG)还原成还原型谷胱甘肽(GSH),由GSSG还原成的GSH和样品本身含有的GSH都不发色底物DTNB反应,生成黄色的TNB和GSSG,前后两个反应合并起来,总谷胱甘肽(GSSG+GSH)就相当于一个呈色的限速反应,总谷胱甘肽(T-GSH)含量决定了黄色含量。通过分光光度法(酶标仪)检测处吸光度,不相应处理的GSH标准比较,分别获得还原型谷胱甘肽(GSH)和总谷胱甘肽(T-GSH),用T-GSH减去GSH即得氧化型谷胱甘肽(GSSG)。该试剂盒可用于检测血浆、血清、组织、细胞等样品中氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量,亦可检测还原型谷胱甘肽(GSH)和总谷胱甘肽(T-GSH)含量。该试剂盒仅用于科研,不用于临床诊断或其他用途。组成:编号TO1042Storage名称100T试剂(A):还原型谷胱甘肽(GSH)标准10mg4?避光试剂(B):GSHassaybuffer100mlRT试剂(C):DTNB10mgRT避光试剂(D):蛋白沉淀剂1gRT避光试剂(E):NADPH10mg-20?避光试剂(F):(G):ddHO50mlRT避光2北京雷根生物技术有限公司-20?避光试剂(H):GSH还原酶原液使用说明书1份自备材料:1、离心管或小试管2、蒸馏水3、离心机4、水浴锅5、96孔板6、酶标仪或生化分析仪操作步骤(仅供参考):1、配制GSH标准储存液:取还原型谷胱甘肽(GSH)标准加入ddHO,溶解并混匀,即为2还原型GSH标准储存液(10mM)。一部分立即使用,其余适当分装后-20?保存。2、配制DTNB储存液:在本试剂盒提供的DTNB中加入DMSO,溶解并混匀,即为DTNB储存液(10mg/ml)。一部分立即使用,其余适当分装后-20?保存。×GSH还原酶:按GSH还原酶原液:GSHassaybuffer混合,即为