微生物学实验目的与要求.doc

--------------------------校验:_____________--------------------------日期:_____________微生物学实验目的与要求实验五病原性球菌目的(一)掌握致病性葡萄球菌的特征;抗链球菌溶血素“O”试验;甲型链球菌与肺炎链球菌区别。(二)熟悉三种链球菌在血平板上的区分;肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌的形态特征。(三)了解病原性球菌的形态、染色性。内容(一)病原性球菌的形态及染色性(示教)。(二)葡萄球菌培养及生化特性(示教)。(三)致病性葡萄球菌的鉴定(操作)。(四)链球菌的培养与抗链球菌溶血素“O”试验(示教与操作)。(五)肺炎链球菌与甲型链球菌的区别(示教)。(六)脓汁或咽拭子分离培养(操作)。一、病原性球菌的形态及染色性(示教)(示教)【材料】金黄色葡萄球菌革兰染色示教片。【方法】油镜观察细菌的形态、排列及染色性。(示教)【材料】乙型链球菌血清肉汤培养物制作的革兰染色示教片。【方法】油镜观察链球菌的形态、大小、排列及染色性。(示教)【材料】肺炎链球菌革兰染色示教片、肺炎链球菌荚膜示教片。【方法】油镜观察二张示教片中肺炎链球菌的形态结构特点及其染色性。(示教)【材料】脑膜炎奈瑟菌革兰染色示教片。【方法】油镜观察注意形态、大小、排列以及染色性。.【材料】淋病性尿道、阴道脓汁涂片(革兰染色)。【方法】油镜观察细菌形态、排列、在细胞内或外及染色性。二、葡萄球菌培养及生化特性(示教)【材料】【方法】,观察二种葡萄球菌单个菌落的形态、大小、表面、边缘、透明度、颜色及溶血性(如颜色不易区别时,可用滤纸片揩抹菌落观察)。,观察二者对甘露醇的分解情况。三、致病性葡萄球菌的鉴定致病性葡萄球菌的鉴定,一般实验室都根据以下特征,其中尤以血浆凝固酶试验意义最大。。。,产酸不产气。。。血浆疑固酶试验:试管法(示教)【材料】见实验四。【方法】见实验四耐热DNA酶试验(示教)【原理】致病性葡萄球菌能产生DNA酶,它可特异地分解DNA的磷酸戊糖联结的磷酸二酯键;且有明显耐热性,经180℃15分钟或60℃2小时也不灭活。,在含DNA基质的琼脂一Tris缓冲液中(),随DNA被分解指示剂甲苯胺蓝从蓝色变粉红色。【材料】经100℃煮沸15分钟后的金黄色葡萄球菌,表皮葡萄球菌24小时液体培养物;甲苯胺蓝-DNA-琼脂()。【方法】-DNA-琼脂培养基的小试管置沸水浴中溶化,浇小玻片一块(琼脂全部用完),待琼脂冷却凝固后,以3mm直径打孔器打2个孔。,加人不同的小孔中,置37℃培养2~3小时后观察结果。,小孔周围仍为蓝色不透明者为阴性。注:指