DNA甲基化抑制鼻咽癌细胞系膜联蛋白A1基因表达.pdf

生物化学与生物物理进展
ProgressinBiochemistryandBiophysics
2009,36(10):1319~1326

DNA 甲基化抑制鼻咽癌细胞系
膜联蛋白 A1 基因表达*
谭双香 1,2) 胡瑞成 1)** 戴爱国 1) 汤参娥 2) 易红2)
程爱兰 2) 陈主初 2) 李建玲 2) 肖志强 2)**
(1)湖南省老年医院- 湖南省老年医学研究所,长沙 410016;2)中南大学湘雅医院卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,长沙 410008)
摘要为了研究不同分化程度和转移潜能鼻咽癌(NPC)细胞系膜联蛋白 A1(ANXA1)mRNA 和蛋白质表达情况及其与基因甲
基化的关系. 培养 NPC E2、5-8F、6-10B 和永生化非癌性人鼻咽黏膜上皮细胞 NP69 细胞用于实验,用甲
基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测 ANXA1 基因甲基化状态,同时利用逆转录- 聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测
ANXA1 基因的 mRNA 表达水平. 然后用不同浓度的 5- 杂氮-2 - 脱氧胞苷(5-aza-2dC)对 NPC 细胞进行去甲基化处理,MSP
忆
和 RT-PCR 方法检测处理组和对照组细胞 ANXA1 基因甲基化状况和 mRNA 表达水平,并用 Western-blotting 方法检测
ANXA1 基因蛋白质表达水平. 结果发现,NP69 细胞 ANXA1 基因无甲基化,4 株 NPC 细胞系 ANXA1 基因都存在不同程度
的甲基化,甲基化程度与细胞的分化程度和转移潜能相关. NPC 细胞 ANXA1 基因 mRNA 表达水平降低,低于 NP69 细胞,
-aza-2dC 能够剂量依赖性地引起 ANXA1 基因去甲基化,经去甲基化处理后,
NPC 细胞系 ANXA1 基因的 mRNA 和蛋白质的表达水平相应提高. 研究证明,NPC 细胞系 ANXA1 基因的 mRNA 和蛋白质
表达水平出现下调,甲基化是导致表达下调的主要原因,5-aza-2dC 去甲基化处理能够恢复 ANXA1 基因的表达水平.
关键词鼻咽肿瘤,甲基化,表观遗传,膜联蛋白 A1,脱氧胞苷
学科分类号 Q5,R73,R76 DOI: .
鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)高发度、进展、转移、预后相关,是一种新的肿瘤抑制
于我国华南地区和东南亚地区,具有显著性的种族蛋白,也是一种具有重要潜在价值的肿瘤生物学标
分布特点和地域分布特点[1]. 虽然历经大半个世纪志物[4~6,10,11].
的研究,NPC 的发病机制目前仍未完全阐明,一 ANXA1 基因的表达调节机制尚有待于进一步
般认为 NPC 发病与遗传因素、病毒感染和环境等深入研究,其在肿瘤中 mRNA 和蛋白质表达水平
因素有关. 近年,越来越多的研究证实基因甲基化同时出现降低[4,12,13],提示表达调节主要发生在基
参与了 NPC 的发生发展过程,目前报道的 NPC 甲因水平或转录水平. 有研究发现 B 细胞淋巴瘤中
基化相关基因近 30 个,