甘草酸二铵原料药-质量研究资料10.doc

甘草酸二铵原料药-质量研究资料1010、质量研究工作的试验资料及文献资料一、样品本公司试制的甘草酸二铵原料药三批:批号为。批量分别为804g,799g,802g。二、含量限度按干燥品计算,%,%。4268216三、性状本品为应白色结晶性粉末;无臭,味甜取本品三批检查,结果见表1。表1甘草酸二铵外观检查结果批号白色结晶性粉白色结晶性粉白色结晶性粉性状末;无臭,味甜末;无臭,味甜末;无臭,味甜本品三批均符合规定。溶解度:本品在水中易溶,在乙醇中极微溶解,在氯仿或乙醚中几乎不溶。依法检查(中国药典2000年版二部凡例),检查结果见表2。表2甘草酸二铵溶解度检查结果溶剂样品量(g)溶解情况结论水在1ml中未全溶,,。四、,加稀盐酸4ml与水6ml,煮沸10分钟,放冷,滤过,滤液备用。取沉淀用水洗涤至中性,105?干燥1小时,加乙醇10ml1使溶解,取乙醇溶液1ml,加10%2,6-%氢氧化钠溶液1ml,至水浴上加热30分钟,液面应出现紫红色悬浮物。本品三批均呈正反应。(1)项下的滤液1ml,加间苯二酚10ml和盐酸5滴,煮沸1分钟,放冷,加苯3ml,振摇,苯层即显紫红色。本品三批均呈正反应。,照分光光度法(中国药典2000年版二部附录?A)测定,在252nm的波长处于最大吸收。本品三批均符合规定。,加水5ml使溶解,显铵盐的鉴别反应(中国药典2000年版二部附录?)。本品三批均呈正反应。五、(中国药典2000年二部附录?D)测定色谱条件及系统适用性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;()-乙腈(75:25)为流动相;检测波长为252nm。理论板数按甘草酸二铵峰计算应不低于1500。甘草酸二铵峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。测定法取本品适量,精密称定,,作为供试品溶液;精密量取适量,加流动相制成每1ml中约含2μg的溶液,作为对照溶液。取对照溶液10μl注入液相色谱仪进行预试,调节检测灵敏度,使主成分色谱峰的峰高约为记录仪满量程的20%,25%;再取供试品溶液10μl注入液相色谱仪,记录色谱图至主峰保留时间的2倍,供试品溶液的色谱图中如显杂质峰,量取各杂质峰面积的总和不得大于对照溶液主峰面积的10倍(10%)。,精密称定,加流动相溶解并稀释制成每1ml中含有甘草酸二铵40μg/ml的溶液,照分光光度法(中国药典2000年版二部附录?A),测定结果见附图9,同法测定中间体?(7β-氨基-3-[3-甲酰氨基-2-(2-甲酰氧基乙基)-1-吡唑鎓基]甲基-3-头孢烯-4-羧酸双三氟乙酸盐)、中间体?(7β-氨基-3-[3-氨基-2-(2-羟乙基)-1-吡唑鎓基]甲基-3-头孢烯-4-羧酸盐酸盐)、中间体?′(1-[(Z)-2-(2-氨基噻唑-4-基)-2-甲氧基亚氨基乙酰基]苯并三氮唑-3-氧化物)紫外最大吸收波长分别为258nm、255nm、257nm,见附图10,12,可见以上中间体在252nm的波长处均有较大吸收,故选择检测波长为252nm。,依法测定,HPLC图谱见图13。,依法测定,HPLC图谱见图14,按甘草酸二铵峰计算,理论板数为6317,。,改变流动相组成及流速,进行耐用性试验,结果见表7(其中水相是:,),HPLC图谱见图15,19。表7甘草酸二铵有关物质检查耐用性试验结果流动相组成流速(ml/min):本方法流动相组成及流速发生一定改变时,理论板数及3主成分峰与最近杂质峰的分离度均符合规定,说明本方法耐用性良好。,,,冷至室温,调节pH值为中性,依法测定,HPLC图谱见图20。由图可见,本品经酸性破坏后,