红曲霉发酵液中桔霉素快速检测方法的优化.pdf

万方数据
红曲霉发酵液中桔霉素快速检测方法的优化班昭,王昌禄’,陈勉华,王玉荣,郑传宝,刘春静,杨华,李风娟质谱等技术证实红曲霉菌产生真菌毒素——桔霉称酚Q氚踩ń逃恐氐闶笛槭遥旖蚩萍即笱称饭こ逃肷锛际跹г海旖红曲是中国传统大米发酵制品,是一种天然食品添加剂。随着人们生活水平的提高以及科学技术的进步,红曲的许多功能性成分被人们发现,进而红曲被广泛地应用于食品、化妆品、制药等行业。年,┦客ü舜殴舱瘛⒑焱夤馄住素⋯。桔霉素最早是在年从青霉。中提取出来的真菌次级代谢产物,真菌中的青霉属、曲霉属中的许多菌株都可以产生桔霉素。桔霉素具有一个羧基,有离子态和非离子态两种形式存在,其结构见图=勖顾鼐哂锌股睾鸵种葡妇罢婢さ奶性。同时发现,桔霉素具有肾毒性、致癌性、致突变等作用旧=勖顾馗弊饔玫拇嬖谘现刂圃剂撕烨的应用。在国外,桔霉素已作为相关食品污染程度的重要指标,红曲产品中的桔霉素问题已经引起相关行业的普遍重视。—————————————·●———————————一我国作为红曲的故乡和主产国,为提高红曲产品的安全性,建立一种简便、快速、灵敏度高的桔霉素检测方法极为重要。对桔霉素进行检测的常用方法是ā’、法‘’、酶联免疫反应法【1疚母萁勖顾亟峁辜靶灾剩恿鞫嗯比,等方面着手,建立了一个简便、快速、灵敏度高、稳定性和再现性好的检测方法,并将其应用到红曲霉液态发酵液和市售红曲米中桔霉素的检测。牧嫌敕椒甀材料与仪器桔霉素标准品购自尽]腿〗勖顾赜乙醇、甲醇、正磷酸治龃、高效液相色谱用乙腈、甲醇均购自尽:烨状咏拧⒛瑞德天然色素公司购买,红曲霉发酵液由本研究室发酵制取。高效液相色谱仪一型高效液相色谱仪琄,。高效液相色谱条件色谱柱:穖,患觳馄鳎河ü饧觳馄鳎觳獠ǔの;柱温:℃;流速:/涣鞫啵阂译妗⒓状加胨幕旌弦海叩比例及流动相的选择见结果与讨论。红曲样品的预处理液态发酵液的预处理:量取的红曲霉发酵液并研碎,稀释至后,加无水乙醇均匀混合,在℃水浴中加热屑湔竦次,·焕胄,取上清液,用穆四微滤后,待用。固体红曲样品的预处理:采用江南大学许赣荣摘要:研究确立了一种高效液相色谱法,能有效地对红曲霉代谢产物中的桔霉素分离和定量分析。色谱柱:,鞫嘧槌晌猇译:ü饧觳馄鳎簁。在优化的色谱条件下绘制标准曲线,当桔霉素质量浓度为“时线性关系良好,.。对桔霉素标品的最低检测质量浓度为·ǎ诤烨狗⒔:红曲霉;桔霉素;高效液相色谱中图分类号:文献标识码:文章编号:———图勖顾氐牧街止剐氨基酸和生物资源,收稿日期:——作者简介:班昭,女硕士生,研究方向:食品质量安全技术基金项:国家自然科学基金%通讯作者猰篶..—×琱—,~~如
万方数据
等‘,在桔霉素的测定方法中,流动相多采用甲醇与水的混合溶液。甐涝ǖ溃谔加了离子抑制剂的流动相中,乙腈和甲醇没有明显差别,但过高的盐浓度会损害柱子。本文比较了用乙腈或甲醇或乙腈与甲醇混合为流动相时对桔霉素检测的影响。实验结果显示:当用乙腈作流动相时,保留时间为ń勖顾胤宓耐衔蚕窒笱现亍⒈A羰间不稳定,影响桔霉素定性和定量的准确度,如图尽2捎眉状嘉A鞫嗍保A羰奔湎喽越长.,但峰对称性较好,如图所示。推测原因是:流动相中的甲醇含量增加、降低,致使非离子态的桔霉素增多,