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光谱法研究橙黄Ⅳ与牛血清白蛋白的相互作用①㈣光谱实验室王欢②王晓玲刘建波引言实验部分血清白蛋白是血浆中含量最丰富的一种载体蛋白,它能与许多物质结合,并起着载体蛋白的运的方法主要有光谱法、电化学方法、核磁共振分析法、质谱法等啪。光谱法因其分析快捷、灵敏度高数据得到了结合常数、结合作用力类型和热力学参数等,并用同步荧光光谱技术考察了瓜的变化。研究结果将为系统地揭示生物大分子与小分子的相互作用的共性规律积累必要的实验数虾>芸蒲в邢薰;一—统逗阄滤」天津市泰斯特仪器有限公司牛血清白蛋白,,:靼补采锟萍加邢薰;橙黄Ⅳ第卷,第月—方程分别处理实验数据,得到了猝灭常数五,、墨、热力学参数魅铡#鱏。,△和结合位输作用。当人体或生物体吸入有毒污染物,进入血液系统后,通过白蛋白为载体转运到各部位‘。橙黄Ⅳ又名籟一交被苯基嫉猐苯磺酸单钠盐,主要用作酸碱指示剂、分析钙、镁用指示剂、除草剂、防火剂、纸张和纺织品的软化剂、金属的清洁剂。目前,研究小分子与生物大分子相互作用已成为最常用的方法之一叫。本文在一腡狧缓冲条件下,采用荧光光谱法和紫外一可见分光光度法研究了橙黄Ⅳ与牛血清白蛋白南嗷プ饔茫胖靥教至顺然脾舳訠的荧光猝灭作用,经处理实验据。仪器和试剂一型荧光分光光度计毡镜航蚬;型紫外一可见分光光度计鹿拿公司籅型分析电子天平啥嗬箍蒲б瞧北京邢薰綸;,采用荧光光谱法和紫外一可见分光光度法研究了橙黄Ⅳ与牛血清白蛋白南嗷プ饔茫芯糠⑾殖然脾舳訠有较强的荧光猝灭作用,用猇点数等,证明二者主要靠范德华作用和氢键作用,同时用同步荧光光谱法探讨了橙黄Ⅳ对瓜蟮挠响。关键词橙黄Ⅳ;牛血清白蛋白;荧光光谱法;紫外可见分光光度法中图分类号:.文献标识码;文章编号;—.一诹争萄羰Ψ堆г夯в牖ぱг荷挛魇∠萄羰形牧致判畔①陕西省教育厅项目②联系人,手机:;:,,。收稿日期:—一;接受日期:—一
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占最。结果与讨论享⋯警蠡‘。蘧泉督⒈敢海./#凇R℃的冰箱中保存,实验所需溶液由此稀释而得;橙黄Ⅳ的橙黄Ⅳ溶液,用二次蒸馏水定容至后摇匀,分别在潞阄戮仓。固定激发固定荧光发射与激发的波长差分别为和时进行同步荧光光谱扫描并绘制同步荧光光谱图。在室温下测定间氩煌ǘ瘸然脾羧芤旱淖贤饪杉展馄住荧光的寿命籕——。——动态猝灭常数·。当猝灭过程卜一——橙黄Ⅳ;!狟然脾簦琧檀黄由图杉孀盼露鹊纳撸珺猝灭曲线的斜率逐渐降低,由此可以初步判断该过程是静宁立达生物科技有限公司籘上海阿拉丁试剂有限公司皇笛樗檬约辆7治龃俊J笛橛盟为二次蒸馏水。储备液:畂×叫疘.,实验所需溶液由此稀释而得;为腡狧缓冲溶液。实验方法在个比色管中,分别加人畂畂ד、、、、、、、、、、畂波长为馄淄ù,中速进行扫描,绘制发射光谱,并记录荧光强度。橙黄Ⅳ对挠ü忖牛血清白蛋白肿幽芄环⑸ü馐且蚝猩氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、大多数情况下认为蛋白质所显示的荧光主要是来自色氨酸残基的贡献。固定牛血清白蛋白呐ǘ龋尤氤然脾簦溆ü馇慷扔泄媛傻慕档停说明橙黄Ⅳ对挠ü庥薪锨库鹱饔茫秸咧浯嬖着相互作用。荧光猝灭作用机理通常可分为动态猝灭和静态猝灭。对于动态猝灭,其作用机理可以用甧—【匠汤表达#疐一一,式中:——。。
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