中药活性指标成分阿克苷制备与鉴定.docx

中药活性指标成分阿克苷制备与鉴定.docx附件1中药活性指标成分阿克昔(Acteoside)的制备与鉴定何江J胡小鹏2,邱榕珠彳,马文杰彳,李涛2深圳大学医学院深圳大学生命科学学院深圳大学化学与化工学院摘要:本实验以苦丁茶木犀科植物紫茎女贞(Ligustrumpurpurascens)叶为原料,通过高效快速的分离纯化方法,制备得到口标化合物。口标化合物经结构鉴定为阿克苛(acteoside)<>关键词:阿克昔紫茎女贞制备鉴定概述阿克昔(Acteoside),又名洋丁香酚昔(《中华本草》)、洋丁香昔(《中药辞海》)、毛蕊花昔、马鞭草昔、麦角當昔等。1963年罗马大学,'I1分离到阿克昔(acteoside)⑴。根据现有的文献查询分析,阿克甘广泛分布于双子叶植物中,含阿克甘的植物包扌乩唇阿克昔(acteoside)分子结构形科(Labiatae)15属41种,紫薇科(Bignoniaceae)4属5种,木犀科(Oleaceae)7属12利列当科(Orobanchaceae)5属10种,玄参科(Scrophulariaceae)21屈34种,马钱科(Loganiaceae)2属7种,马鞭草科(Verbenaceae)12屈31种,车前科(Plantaginaceae)2属7种,爵床科(Acanthaceae)2属3种,木兰科(Magnoliaceae)1属2种,苦槛蓝科(Myoporaceae)1属1种,蓼科(Polygonaceae)1属1属,positae)1属1种,胡麻科(Pedaliaceae)1属1种,桔梗科(Campanulaceae)1屈1种,胡椒科(Piperaceae)1屈1种,苦苣苔科(Gesneriaceae)1属1种,蔷薇科(Rosaceae)1属1种,共计79属160种植物。现代药理研究表明阿克昔具冇多种生理活性:抗氧化,抗病毒,保肝,抗肿瘤转移,抗炎,降血脂,抗菌,神经保护,降血压和心血管保护等⑵。由于阿克昔具有多种生理活性,口分布广泛,资源丰富,因此对其费用价值的研究己成为天然药物研发的新热点。阿克莒屈新一类天然活性结构分子,随着药理研究的不断深入,必将为其带来广泛的临床应用前景。阿克昔为苯丙索昔类成分,可溶于醇类有机溶剂,溶于水,极性大,阿克昔分子结构对热和光不稳定,分离纯化难度大。探索高效快速制备和鉴定的方法,有益于阿克苛的药物研究和开发。实验部分一、 实验仪器及试剂比旋度J—20C旋光光谱仪测定,紫外光谱用UV—210A型紫外光谱仪测定,红外光谱用IR-450型红外光谱仪测定,核磁共振谱用WH-400型核磁共振仪测定,FAB-MS用JAB—IIS测定。层析柱材料用硅胶,D101人孔吸附树脂,SephadexLH-20o薄层层析用高效硅胶G板(HPTLC,silicagel,Merck),展开剂为CHC13—MeOH—H2O(7:3:05)。有机溶剂用甲醇,乙醇和氯仿等。二、 (Ligusfrumpurpurascens)叶,剪碎,放入10L加热回流提取磨口器皿中,加入5LMeOH,加热回流2小时后,静置放凉,然后过滤,得提取液H1;随后,再重复操作一次,得提取液H2(提取流程见图l)o合并两次提取液Hl和H2,并减压浓缩,。,充分搅拌混匀,然后静置一小时,滤岀上清液,如此反复操作三次,将所得的上清液合并,并直接上D101树脂(1500g)层析柱分离。D101树脂层析柱分别用纯净水、50%甲醇和甲醇洗脱,得到三组憾分:A(),B()和C()。所得A、B、C三部分,经TLC检测[硅胶G,展开系统CHCls—MeOH—H2O(7:3:)],B部分含有阿克昔。B部分()经硅胶层析,干柱切割法,得到三部分:E()、F()和G()o将含冇阿克苜的F部分进行硅胶柱层析,以CHCla—MeOH—H2O溶剂系统洗脱得到7组懈分(如图1所示)。其中F3部分()再进行一次硅胶柱层析分离,-|MeOH(51x2)(4£x3)[D101大孔吸附树脂层析H2O- (切割法)CHCIrMeOH-:3: F -MeOH- F3 F4F5 F63・2g|-|Seph