解脲支原体MB蛋白金标检测试剂盒胶体金法作业指导书.docx

解脲支原体MB蛋白金标检测试剂盒胶体金法作业指导书.docx解腺支原体MB蛋白金标检测试剂盒胶体金法作业指导书1目的建立解月尿支原体MB蛋白金标检测试剂盒(胶体金法)作业指导书,确保生产过程处于受控状态。适用于解服支原体MB蛋白金标检测试剂盒(胶体金法)相关工序的操作者。。。。—►测—►被NC反应膜检涮★NC膜处理NC膜检测兔抗鼠抗IgG抗体体制备 >检测注:探关键过程 ★(柠檬酸三钠述原法)氯金酸(HAuCb)水溶液放入三角瓶内加热至沸腾一加热柠檬酸三钠溶液-混匀,搅拌煮沸10至15分钟一待胶体金溶液颜色由蓝一紫->红,冷却即可。(反应膜)--加入解腺支原体单抗,15分钟后加入聚乙二醇一离心,调532nm测OD值5〜10,方阵滴定法选定标记工作浓度一用无纺布浸湿胶体金溶液,干燥、平整,检测。%。比例抽检,与标准反映膜兀配组装成品,同时与标准成品作如下对照检测。a) 符合率:样品稀释液、阴性质控品无假阳,高、中、低浓度(0」ug/>10ug/ml)支原体阳性质控品均呈阳性。b) 敏感度:。c) 反应强度:+/+++邙日性反应线/阴性反应线)。d) 反应时间:30s〜5min。确认合格后才能转入下一工序。NC反应膜制备亲和性高分子硝酸纤维素膜一活化处理12小时一用水洗5次,每次20分钟〜室温干燥后一取纯解嫌支原体MB蛋白单抗和兔抗鼠IgG抗体溶于10%CS中,浓度均为2mg/ml,用解啄支原体单抗在NC膜上包被衣原体阳性反应线-*用兔抗鼠IgG抗体在NC膜上包被阴性对照线一干燥后,用BS液封闭H20清洗后,室温干燥,备用。:将制备好的反应膜按5%。比例抽检,与标准金标抗体反应膜匹配组装成品,同时与标准成品对照检测;观察阳性、阴性包被线及本底,要求图形规则程度均匀,无遗漏或重复包被。,灵敏性和符合率筛选:按3%比例/批,随机取样,每张5〜10人份,作阴性参比品和高、中、底(、)三个浓度的阳性参比品检测,灵敏度解腺支原体最小检岀g/ml,无假阳性,均一性299%。(mm)组装方式反应膜(S1)20见图1无纺布(S2)25,30吸水纸(S3)30金标反应膜(S4)10双而胶带(S5)29,:在S6塑料基板上贴双而胶带S5(29,48mm)二条;在S5上贴反应膜SI(20mm),S1上下缘距S6上下缘各29mm;在S6上贴吸水纸S3(30mm),吸水纸下缘与S1上缘交接1mm,上缘与S5的上边缘对齐;在S5下端贴无纺布S2-1,其上缘压住S1下缘1mm;在S2-1±平放金标抗体反应膜S4(10mm)上缘对齐;0在S4上平放无纺布S2・2(30mm)上下缘分别S4、S6对齐;g)将组装成型的反应体系用电脑可调式切割机切成5mm测试条,装入干燥器,待包装。:每支成品先装聚苯乙烯塑料外壳,再用镀铝膜包装加干燥剂,附说明书,打批号入库,每批留样100人份,,以样品稀释液(A液和B液1:1混合液)分别配成高、中、低(10Ug/ml,lug/ml,)三个浓度,,・70°C保存。(A液和B液1:1混合液),,・70°C保存。《解尿支原体MB蛋白金标检测试剂盒(胶体金法)》产品注册标要求。」要求a) 检测条:表面应平整、无划伤、开裂、变形及污渍;检测卡各组分附着牢固、内容齐全;b) 检测卡:外壳应平整,上下盖应均匀合拢,无明显间隙;反应芯试条在外壳内应附着牢固;检验在自然光线下,用手感和目力观察方法进行检验。)1尿支原体MB蛋口,凡解腺支原体MB蛋白等于和高于该浓度时检测线和对照线均显色,而低于该浓度时检测线不显色,但无论任何浓度对照线均应显色。测试a) 试剂1) X白对照液:样品稀释液;2) 测定样品液:10ug/ml,lug/ml,,<