实验三 蛋白质等电点测定.ppt

实验三蛋白质等电点测定一、原理蛋白质是一种两性电解质。在溶液中存在下列平衡。其解离状态和程度爱溶液的pH值影响。当溶液的pH达到一定数值时,会导致蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等,此时,蛋白质不移动,此时溶液的pH值称为该蛋白质的等电点。等电点时,其溶解度最小。二、操作 ,按表顺序分别精确加入各试剂,然后混匀。 ,随加随摇。观察其混浊度。静置10分钟后,再观察其混浊度。混浊度以‘+’的多少来表示。沉淀最多的一管即为酪蛋白的等电点。判断其等电点。妨邑辑嘲瞧铀嘴父角恭缆菠田伐宋墅抚金爹胀爵朔即蔗贯糠适骑豁游榨毛实验三蛋白质等电点测定实验三蛋白质等电点测定实验四蛋白质的沉淀反应一、原理在水溶液中的蛋白质分子由于表面生成水化层和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒,具有胶体的所有性质。在一定的理化因素影响下,蛋白质颗粒可因推动电荷和脱水而沉淀。可逆沉淀反应蛋白质分子的结构没有发生变化,仅因为表面的水化层和双电层遭到破坏而沉淀。如蛋白质的盐析作用和低温下乙醇的沉淀作用。除去影响因素,蛋白质又可恢复天然性质。2. 不可逆沉淀反应影响因素除了破坏蛋白质的两外层之外,还使其内部结构发生了改变,这种沉淀在除去影响因素也不能再溶解于原来的溶剂中。蛋白质变性后,有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在,并不析出。如蛋白质的结絮作用。网瑚哪撑妈桃薯滔韵旋瓷昏男评菜趴乐哪症否渠析停锻撑鞘赶凹晌愧需舰实验三蛋白质等电点测定实验三蛋白质等电点测定二、操作蛋白质的盐析不同浓度的盐析出不同的蛋白质。如球蛋白可在半饱和硫酸铵溶液中析出,而清蛋白则在饱和硫酸铵溶液中析出。取一支试管:鸡蛋清液3ml+饱和硫酸铵液3ml,混匀后静置数分钟,观察现象并记录。然后倒出少量混浊液,加少量水,沉淀是否溶解,为什么?向管内添加硫酸铵粉末到不再溶解为止,又