CTC检测技术.pptx

ASCOAnnualReport:,1869,14:146-147AllardWJ,,2004,10:6897-,,;10:6897-6904循环肿瘤细胞的特性Mego,M,-Knoll,(2012)31:673–687CTCs可以是间质型、上皮型、上皮间质混合型、成团的CTCs(CTM)BreastCancer:NEnglJMed351:781-791,2004ProstateCancer:LancetOncol10:233-239,2009ColorectalCancer:JClinOncol26:3213-3221,2008CTC对于无进展生存期与总生存期的有效预测CTCs检测的临床可行性如何检测CTCs?CTCs的富集:如何获取CTCs?每10mL血液中可能仅含有几个到几十个循环肿瘤细胞,而10mL血液中含有的白细胞约有1亿个,红细胞有500亿个。※从红细胞和白细胞中富集恶性肿瘤细胞CTCs的鉴定:如何鉴定所获细胞为CTCs?※将恶性肿瘤细胞与红细胞、白细胞、正常上皮细胞、造血干细胞等区分开来循环肿瘤细胞的检测CTCs检测技术HarouakaR,KangZ,ZhengSY,;141(2):209-(根据细胞表面标志物)阳性富集法:CellsearchTM系统CTC芯片(CTC-chip)MACS®CellSeparation阴性筛选法:EasySepCyttel过滤法(根据细胞大小)ISET膜过滤密度梯度离心(根据细胞密度)OncoQuick分离体系流式细胞检测法无CTCs的检测方法及代表技术产品免疫捕获法——磁珠分选原理:将特异性抗原包被在已有同源二抗的磁珠上制成免疫磁珠再与靶细胞上抗抗原结合成“靶细胞—抗原抗体—磁珠”复合物,在磁场作用下向一定方向移动,:使用表面耦联抗目的细胞抗体的磁珠,细胞与磁珠结合后直接在磁场中被分离出来。负性筛选:通过去除无关细胞使目的细胞得以纯化