MicroRNA-205抑制喉鳞状细胞癌增殖诱导其凋亡的实验研究.doc


MicroRNA-205 抑制喉鳞状细胞癌增殖诱导
其凋亡的实验研究#
刘鸣,田霖丽,张佳蕊,葛靖春*
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(哈尔滨医科大学,附属二院,耳鼻咽喉头颈外科,哈尔滨 150086)
摘要:从基因和蛋白质水平上研究 microRNA-205 在喉鳞状细胞癌的增殖以及凋亡方面的作
用,探讨 microRNA-205 在喉癌发生发展中的作用机制。选取 30 例未经接受任何治疗的喉
癌患者的喉癌组织以及喉部正常组织,运用 real-time PCR 方法检测其内 microRNA-205 基因
的表达情况。采用质粒转染技术,将携带 microRNA-205 基因的质粒转染到 Hep-2 细胞内,
并运用 real-time PCR 方法检测 Hep-2 细胞内 microRNA-205 基因的表达水平。本实验将 Hep-2
细胞分为 3 组,通过 MTT 方法检测各组 Hep-2 细胞的生长与增殖情况。通过流式细胞仪检
测各组 Hep-2 细胞的凋亡情况。运用 western blot 方法检测各组 Hep-2 细胞内 Bcl-2 蛋白的
表达水平。Real-time PCR 检测结果显示,相对于喉部正常组织,microRNA-205 在喉癌组织
中表达水平明显降低(P < );microRNA-205 在 T2-T4 期喉癌组织中的表达水平明显低于
T1 期(P < );相对于Ⅰ期喉癌组织,microRNA-205 在Ⅱ-Ⅳ期喉癌组织内的表达水平明
显降低(P < );喉咽癌组织内的 microRNA-205 表达水平明显低于声门上型喉癌组织(P <
);实验组 Hep-2 细胞内 microRNA-205 基因的表达水平明显高于阴性对照组和空白对照
组(P < )。通过 MTT 检测结果发现,实验组 Hep-2 细胞的增值能力明显低于阴性对照组
和空白对照组。流式细胞仪检测结果显示,实验组 Hep-2 细胞的凋亡比阴性对照组和空白对
照组显著增多。Western blot 结果显示,相对于阴性对照组和空白对照组,实验组 Hep-2 细
胞 Bcl-2 蛋白的表达水平受到明显抑制。MicroRNA-205 可抑制喉鳞状细胞癌的增殖,并通
过调节 Bcl-2 蛋白的表达水平,从而发挥促进喉鳞状细胞癌凋亡的重要作用。
关键词:喉鳞状细胞癌;microRNA-205;Bcl-2 蛋白;增殖;凋亡
中图分类号:R73,R76
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MicroRNA-205 inhibites growth and promotes apoptosis of
cell line by regulating Bcl-2
Liu Ming, tian linLi, Zhang Jiarui, Ge Jingchun
(Department of Otolaryngology, Head and Neck Surgery, The Second Affiliated Hospital, Harbin)
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Abstract: In order to explore mechanisms of microRNA-205 in laryngeal squamous cell
carcinoma, we did the research, on the ic and protein level, to investigate the effect of
microRNA-205 on the growth and apoptosis of laryngeal squamous cell carcinoma
tissue and non- carcinoma tissue of the patients, who suffered from laryngeal squamous cell
carcinoma and without any trament, were used to detected the expression level of microRNA-205
by real-time PCR. The technology of transfection was used to transfect microRNA-205 into Hep-2
cells, and the the expression level of it was detected by real-time PCR. In this study, Hep-2 cells
were divided i