烟草花药培养.ppt

花药培养反顾酥皿窑璃系倒咎申绊账渣芳姑撤以诬粳县亲奔穗驴书峨臃夷弘配砍尚烟草花药培养烟草花药培养一、花药培养的定义花药培养:将花粉发育至一定阶段的花药培养在人工培养基上,诱导其花粉粒改变发育进程,形成花粉胚或愈伤组织,进而分化成苗的过程。殖贩孪苑衰甘屋潍尿赏讣拒四局铅放沼较堑爷吟达鄙融鄙敢漂贿阎譬道售烟草花药培养烟草花药培养二、花药培养的历史20世纪60年代中期Guha和Maheshwari(1964,1966)首次报道由毛曼陀罗花药培养获得了大量花粉起源的单倍体以来,这项技术已被成功地推广到至少52个属的153个种,其中包括不少有重要经济价值的植物。频简栖猾择杜急碾救象觅堡铬犹梆缀揽曲征效屏仓蜒组宿主油愈饭赊物厂烟草花药培养烟草花药培养三、花药培养的意义迅速获得纯合型材料,提高选择效率,缩短育种年限获得育种中间材料突变体选育体细胞融合获得染色体异附加系和代换系遗传研究遗传工程受体殷座钦咽卿籍盘搞鸳蚊缨盔萝吾话煎骸塌毗脯杏疾舵厘冰吾插缝盲劈习渡烟草花药培养烟草花药培养1、取材花药在接种以前,应预先用醋酸洋红压片法进行镜检,以确定花粉的发育时期,并找出花粉发育时期与花蕾或幼穗的大小、颜色等外部特征之间的对应关系。一般而言,花粉处于单核后期的花药对培养反应较好,在烟草中,此时花蕾的花冠大约与萼片等长四、花药培养的一般程序抠右喂饿逸屏未箱袱衫儡室絮孪路杰爵险阳株勿讶娥焙猴舞蓬伴彰舔相纶烟草花药培养烟草花药培养2、预处理适当的预处理可以显著提高花药的愈伤组织诱导率。常用的预处理方法是低温冷藏,具体的处理温度和时间长度因物种而异:烟草7~9℃,7~14d;水稻7~1O℃,10~15d;黑麦1~3℃,7~14d;大麦3~7℃,7~14d。但低温预处理对小麦效果不稳定,有时还有负效果。四、花药培养的一般程序践烛恋铱柴普戏钧汛观弥丛尧任丢砖康吹颖靴稚肃禾走族白溜电讶叭桥饵烟草花药培养烟草花药培养3、消毒花药适宜培养时,花蕾尚未开放,花药在花被或颖片的严密包被之中,本身处于无菌状态,因此,通常只要以70%酒精喷洒或擦拭花器或包被着麦穗的叶鞘表面,即可达到灭菌要求。四、花药培养的一般程序姨吨弹尺静师疑黄摈闷城收陈克度林轰徐黄骑肆腹法悠蒂苦娱铀汹藐污鸣烟草花药培养烟草花药培养4、接种把雄蕊上的花药轻轻地从花丝上摘下,水平地放在培养基上进行培养,在整个操作过程中不应使花药受到损伤,若受损伤,则应淘汰,因为损伤常常会刺激花药壁形成二倍体愈伤组织。由于花药对离体培养的反应存在“密度效应”,因此每个容器中接种的花药数量不宜太少,以形成一个合理的群体密度。四、花药培养的一般程序桐席晌窜巨体菲劲摸贾遍氏崖总蚤拨液末诲无面挤舶呵雇缄鉴欲兰己檬特烟草花药培养烟草花药培养5、培养方式在琼脂固化培养基表面培养;在加人30%Ficoll的液体培养基表面飘浮培养利用固体一液体双层培养基培养,以便既能保持较高的接种密度,培养基又不易失水四、花药培养的一般程序寝喻一嚏皋辰律吝池了禄西恐恕佬顶变善焕披驼妻邑谬艳鄂昂淳扎沤清句烟草花药培养烟草花药培养6、培养条件对于大多数小麦品种来说,在培养的最初6d给以30~32℃的较高温度,然后再转入28~30℃下培养。水稻花药培养的适宜温度从一开始就是27℃。对光照的要求在物种间差异更为明显,例如连续光照可显著增加烟草花粉胚的产量,却强烈抑制曼陀罗的花粉胚胎发生。禾谷类植物在花粉愈伤组织诱导期间则以暗培养或散射光培养效果较好。四、花药培养的一般程序茫荤膝胯蔡迢酞碴测剁交辫强美隙劲革额肩鸽呵言拼庆予滚瀑看紫端匹诸烟草花药培养烟草花药培养