革兰氏染色与荚膜染色.ppt

革兰氏染色与荚膜染色一、目的与要求:1、掌握革兰氏染色法和细菌荚膜染色法。2、观察菌体的一些简单结构。二、原理及说明:染料:用作细菌的染料是一些含有苯环为基本单位,并具有发色基和助色基的化合物,若助色基解离后带上正电荷者,能与酸性物质结合生成盐,系为碱性染料,如番红、结晶紫、孔雀绿等;反之,助色基解离后,带负电核能与碱性物质结合生成盐,称为酸性染料。一些具有两类性质的染料称为复合染料。细菌细胞等电点PH一般在2~5,能与中性,碱性及弱酸性的碱性染料结合,因此,通常采用碱性染料进行染色。染色可分为简单染色和特殊染色。区别:前者只采用一种染料,适应于菌体一般形态的观察;后者采用两种以上的染料,用于研究细胞内部的构造。袱进露经间今怀傲整凤淑粒夹庄逞泻宁渗景臃掐辰钎儡浴卒掖蕴蔷鳃共察革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色三、革兰氏染色法革兰氏染色法是把细菌用两种性质不同的染料进行处理,根据细菌对染色反应的不同,可区分为革兰氏阳性(正反应)和革兰氏阴性(负反应)两大类群,故又称为鉴别染色法,这是细菌学中极重要的一种染色法。在正常情况下,某种细菌经过结晶紫染色。碘液媒染,再以酒精脱色,最后以番红复染;如不被酒精脱色菌体呈紫色,称为革兰氏阳性(常以G+表示);若为酒精脱色,则被番红色复染,使菌体呈红色,称革兰氏阴性(以G-表示)。渊交屁珠躇哼虱凉陈骇钮谰巢溅砒芭占垦汰愁钡缩址刑衣因正或剩访析府革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色四:方法步骤1、菌株:大肠杆菌;金黄色葡萄球菌2、流程路线:涂片干燥固定草酸铵结晶紫染色1min水洗干燥碘液媒染1min水洗干燥95%乙醇脱色15~20秒水洗干燥番红复染1min水洗干燥镜检镇兔网批簧本狙抉矿烦帛聋耙裔珍铂仔吱氖贴绪切拯漠柿罪停酬篱镜柴罢革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色(1)涂片干燥固定:21决硷藕靳斗刊迄挨般白坛葵脸舒诚寅樱钉蔬绕哎涛渗肝尉访咽寻牧苛荣肄革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色(2)草酸铵结晶紫染色1min水洗干燥旧河淆苛篡青脉佳装族夹刺服木还掀乏创肃碎震旱野粟绑臼醛抉诫眷篓拆革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色(3)碘液媒染1min水洗干燥驯们汐丫玫阉刽娶祸磺岳烯坦郁减拣先苦嘶婿饱制忽仁防谜限昭颗桃郭自革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色(4)95%乙醇脱色15~20秒水洗干燥札祟镊舰衬抉九鸯墒塔跨铂抿唤萍拴材煤闺蘸拔萌花怠碰与哈钒照捷桑陵革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色(5)番红复染1min水洗干燥镜检撕晓又起纳昨很亚毯芜吏学房洁禄牲扁挞化待饯豁昂约网悦魂宽铃献铬康革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色五、注意事项:(1)在涂片时不可过厚,否则在染色脱色时,都不易均匀,固定时,不可过热,以载玻片不烫手为宜。(2)严格掌握脱色程度,是革兰氏染色的关键步骤。如脱色时间太长,阳性菌会误为革兰氏阴性菌,时间不足,革兰氏阴性菌会误为革兰氏阳性菌。(3)在镜检时,以分散开的菌体的革兰氏染色反应为准。孝幼皂粗堕济牵缠昆找竟烁荐钦居问失剥靠况新感垄钙黍栋竹矣架湖怪杠革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色荚膜染色法一、原理及说明:某些细菌生长到一定阶段,在一定条件下会向细胞壁外分泌一层粘性的多糖类物质——荚膜。荚膜含水份多。疏松且较薄。它受热易失水变形。所以,一般不加热固定。荚膜不易染色,故常用衬托染色法,即将菌体和背景着色,而将不着色的透明的荚膜衬托出来。二、材料:钾细菌绑桃哀农剩汀膊辖滩酉举秒竿绥材朔底淖会抠姬明雕矛邀护虽呵盔加侩奔革兰氏染色与荚膜染色革兰氏染色与荚膜染色