高压蒸汽灭菌.doc

高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌是将物品放在密闭的高压蒸汽灭菌锅内,在一定的压力下保持15~30分钟进行灭菌。此法适用于培养基、无菌水、工作服等物品的灭菌,也可用于玻璃器皿的灭菌。将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅夹套间的水沸腾而产生蒸汽。待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中排尽,然后关闭排气阀,继续加热,此时由于蒸汽不能溢出,而增加了灭菌锅内的压力,从而使沸点增高,获得高于100?的温度,导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。在相同的温度下,湿热灭菌的效果好于干热灭菌。有三点原因:在湿热灭菌中菌体吸收水分,蛋白质容易凝固变性,蛋白质随着含水量的增加,所需凝固温度降低;湿热灭菌中蒸汽的穿透力比干燥空气大;蒸汽在被灭菌物体表面凝结,释放出大量的汽化潜热,能迅速提高灭菌物体表面的温度,从而增加灭菌效力。实验室常用的灭菌锅有非自控手提式高压蒸汽灭菌锅和自控式灭菌锅,其结构和工作原理是相同的。本实验介绍的是非自控手提式高压蒸汽灭菌锅,自控式灭菌锅的使用可参考厂家说明书。具体操作步骤如下::首先将内层锅取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面没过加热蛇管,与三角搁架相平为宜。切勿忘记检查水位,加水量过少,灭菌锅会发生烧干引起炸裂事故。:放回内层锅,并装入待灭菌的物品。注意不要装得太挤,以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果。装有培养基的容器放置时要防止液体溢出,三角瓶与试管口端均不要与桶壁接触,以免冷凝水淋湿包扎的纸而透入棉塞。:将盖上与排气孔相连的排气软管插入内层锅的排气槽内,摆正锅盖,对齐螺口,然后以对称方式同时旋紧相对的两个螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气,并打开排气阀。:打开电源加热灭菌锅,将水煮沸,使锅内的冷空气和水蒸汽一起从排气孔中排出。一般认为当排出的气流很强并有嘘声时,表明锅内的空气已排尽,沸腾后约需5分钟。:冷空气完全排尽后,关闭排气阀,继续加热,锅内压力开始上升。:当压力表指针达到所需压力时,控制电源,开始计时并维持压力至所需的时间。,?,20分钟灭菌。灭菌的主要因素是温度而不是压力,因此锅内的冷空气必须完全排尽后,才能关闭排气阀,维持所需压力。:达到灭菌所需的时间后,切断电源,让灭菌锅温度自然下降,当压力表的压力降至“0”后,方可打开排气阀,排尽余下的蒸汽,旋松螺栓,打开锅盖,取出灭菌物品,倒掉锅内剩水。压力一定要降到“0”后,才能打开排气阀,开盖取物。否则就会因锅内压力突然下降,使容器内的培养基或试剂由于内外压力不平衡而冲出容器口,造成瓶口被污染,甚至灼伤操作者。?恒温培养箱培养24h,检查无杂菌生长后,:将已灭菌的培养基放入37使用。蒸汽杀菌锅一、特点:蒸汽杀菌锅高温杀菌是将肉制品或其它可以高温杀菌的食品,经过真空包装后,放入杀菌锅内进行有控制的升温,保温和降温过程而达到商业无菌目的的一种工艺。二、应用范围:蒸汽杀菌锅主要适用于罐头(如:肉类、鱼类、蛋类、蔬菜类等罐头)及需要高温杀菌的蛋白饮料(如:马口铁罐、玻璃瓶罐头、蒸煮袋等)。特别适合罐头类(如:火腿肠、蒸煮袋装鸡、扒鸡、纯牛奶等)。操作说明一般罐头食品厂对罐头作常压水煮加热杀菌处理时都采用本形式的卧式杀菌锅,本设备通过引入压缩空气可实现反压杀菌。如冷却需在锅内进