反转录PCR在真菌性角膜溃疡快速诊断中的价值.pdf

国际眼科杂志年月第卷第期..
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· 临床研究·
反转录在真菌性角膜溃疡快速诊断中的价值
赵林,张繁友
作者单位:中国辽宁省大连市第三人民医院眼科核苷酸序列为通用引物,对临床拟诊为真菌性角膜溃疡的
作者简介:赵林,硕士,副主任医师,研究方向:角膜病、角膜例标本进行—检测,并与培养方法进行对比。
移植。结果:在处出现扩增带者为阳性。份临床
通讯作者:赵林.. 标本的真菌培养阳性,阳性率为.% ,而经—扩
收稿日期:——修回日期:——
增阳性率为.% ,扩增准确性为.% ,敏感性为
.% ,特异性为.% 。
结论:真菌通用引物进行反应检测真菌性角膜溃疡
速度快、阳性率高,有助于真菌性角膜溃疡的快速诊断。
关键词:聚合酶链反应;真菌性角膜溃疡;诊断
:./..—...
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赵林,
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:., 引言
’, , 真菌性角膜溃疡是一种严重的感染性角膜疾病,常有
.. . 植物性外伤病史,致盲率高。真菌性角膜溃疡于年
:——:——首先由报导。以往由于发病率不高,文献上较少提
及,近年来随着广谱抗生素、糖皮质激素和免疫抑制剂的
广泛应用,真菌性角膜溃疡的发病率呈上升趋势,,在
· : 我国某些地区已上升为角膜感染的首位。许多病例特
—别是不典型病例早期明确诊断较为困难,进而延误了治
—. 疗,造成角膜穿孔、眼球摘除,因此寻找快速、准确的实验
· :, 室诊断方法对临床早期诊断具有重要意义。以往用真菌
培养方法鉴定真菌因费时而不能满足临床诊断、治疗的需
, 要。所以,我们采用条件致病性真菌保守区的寡
核苷酸序列为通用引物,
—, 对例临床上拟诊为真菌感染病例的标本进行检测,并
. 与培养方法进行对比,报告如下。
· :
对象和方法
.
.对象选择—/—来我院就诊的被临床拟
.% . —
诊为真菌性角膜溃疡患者例眼,男例,女例;
.% ..
年龄~平均岁;病程~;左眼只,右
.% .
眼只。
.% . .% .
.方法
· :
..培养方法所有患者均经奥布卡因眼角膜
. 局部表面麻醉,在无菌操作下刮取角膜溃疡边缘和/或溃
· 、,、/\,: : 疡底部的菌丝苔被份,份做培养,在无菌操作下接种
; 于沙氏琼脂培养基斜面,置于℃~℃,湿度% ~
% 的温箱中孵育培养~,有真菌生长者根据菌落
,.—特征、颜色以及乳酸酚棉蓝染色镜检菌丝、孢子特征进行
. 菌属鉴定;另份做检测。
;:—..方法的制备:刮取的另一份病灶组
,然后加入
摘要溶壁酶,℃温育,离心,弃
目的:探讨聚合酶链反应—快速检测在真菌性角上清,然后按照真菌基因组提取试剂盒说明
膜溃疡诊断中的价值。书操作,提取的反转录做。检
方法:以条件致病性真菌基因保守区的一对寡测:真菌通用引物采用’℃一,和
,.,.,. ..
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一’, 总体积为性角膜炎,敏感性达% ;等成功将结合单
,其中由大连宝生物生化科链构象多态性分析应用于临床中烟曲菌