SR-AⅠ反义和抗体对单核细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达的影响.pdf

南华大学
硕士学位论文
SR-AⅠ反义和抗体对单核细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制剂
表达的影响
姓名:危当恒
申请学位级别:硕士
专业:生物化学及分子生物学
指导教师:万腊香;杨永宗
20030501
研究生危当恒南华大学硕士学位论文
主要英文缩略语索引

英文缩写英文全文中文全称
动脉粥样硬化
活化蛋白一
清道夫受体
基质金属蛋白酶
碱基对
胆固醇酉旨
胆固醇
基质金属蛋白酶组织抑制剂一
基质金属蛋白酶组织抑制剂一
佛波酷
磷酸盐缓冲液
每分钟转速
光密度
氧化型低密度脂蛋白
逆转录聚合酶链式反应

尿激酶型纤维蛋白酶原活剂
十二烷基磺酸钠
研究生危当恒‘南华大学硕士学位论文
反义和抗体对单核细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制
剂表达的影响
中文摘要
生物化学及分子生物学硕士研究生危当恒
导师万腊香教授
杨永宗教授
类清道夫受体是清道夫受体超家族的重
要成员之一,可通过识别和清除受损的蛋白质或细胞碎片以及病原体等,在机体的
防御、细胞戮附、信号转导等多种生理及病理过程中起着非常重要的作用。研究表
明能摄取和内化修饰脂蛋白,有利于巨噬细胞转变为泡沫细胞,并对巨噬细
胞的功能有重要的调节作用,但对基质金属蛋白酶及其组织抑制物的关系尚
不清楚。本研究用清道夫受体的反义寡核昔酸和单抗作用于巨噬细胞不同时相,
观测人清道夫受体与基质金属蛋白酶、基质金属蛋白
酶及其组织抑制剂的关系,以进一步阐明的功能。
反义和抗体对巨噬细胞基质金属蛋白酶及其组织抑制剂
表达的影响
目的研究反义和抗体对巨噬细胞基质金属蛋白酶、基质金属
蛋白酶表达和活性及其组织抑制剂表达的影响。
方法用佛波酷处理人急性白血病单核细胞,使其转化为巨噬细胞,
然后分别加人清道夫受体正义寡核昔酸、反义寡核昔酸及单克隆
抗体孵育检测表达,检测
及蛋白质表达,明胶酶谱法检测
的活性。
结果处理细胞细胞由单核细胞转化为巨噬细胞,
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细胞由悬浮型转变为贴壁型。反义和抗体上调表达水平,但
对水平无明显影响。反义和抗体能上调的
蛋白质表达及活性,并能降低及的蛋白表达。
结论与单核细胞源性巨噬细胞的表达调节相关。
反义和抗体上调单核细胞源性巨噬细胞的表达。
反义和抗体对巨噬细胞源泡沫细胞基质金属蛋白酶及其
组织抑制剂表达的影响
目的研究反义和抗体对巨噬细胞源性泡沫细胞基质金属蛋白酶
、基质金属蛋白酶及其组织抑制剂表达的影响。
方法用佛波酷处理人急性白血病单核细胞,使其转化为巨噬细胞,
再加入与巨噬细胞共孵育小时。分别加人清道夫受体正义寡核昔酸、
反义寡核昔酸及单克隆抗体孵育高效液相色谱法检测细胞内胆固醇和胆固醇
酷含量,油红染色观测细胞内中性脂质。反应检测细胞内的活性氧。
检测表达,检测
及蛋白表达,明胶酶谱法检测的活性。
结果细胞经处理后,细胞由单核细胞转变为巨噬
细胞,细胞由悬浮型转变为贴壁型。将巨噬细胞和共孵育小时
后,细胞内胆固醇酷从士增加到士,并且细胞内胆固
醇酷的含量超过总胆固醉的油红染色显示,胞浆内有大量的脂滴存在,符
合泡沫细胞特征。在巨噬细胞泡沫后,细胞内的活性氧的含量显著增加。用
反义寡核昔酸及抗体处理后能显著降低细胞内活性氧的含量
能降低巨噬细胞泡沫化后的表达及活性,能相应增加及
的表达。
小结①反义和抗体能降低巨噬细胞源性泡沫细胞活性氧含量。
②与巨噬细胞源泡沫细胞表达调节密切相关。
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总结①反义和抗体能上调单核细胞源巨噬细胞的表达。
②
与表达调节密切相关
③
反义和抗体能降低巨噬细胞源性泡沫细胞活性氧含量
关键词动脉粥样硬化人清道夫受体基质金属蛋白酶组织型基质金属蛋
白酶抑制剂氧化型低密度脂蛋白巨噬细胞
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口


口




















、
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。一,

①比

②












、
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士士
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前台
清道夫受体是一个超家族,至少包括类类、
类、类、和等。它们在结构上有较大的差异,但有类似
的配体结合谱,能结合和内化多种多聚阴离子化合物如修饰脂蛋白、马来酞牛血