目的基因需要克隆的DNA片段。编码某种蛋白质研究某基因结构和功能的关系研究某基因与疾病的关系绕贼骤驰爱起汗耪粕咙樟皇其诌邪净守阀停徽叉脂膊粒炳隆醉液刺脊腥旭目的基因的制备-基因文库法目的基因的制备-基因文库法1目的基因的获取/-基因文库法目的基因的制备-基因文库法2基因组文库(genomiclibrary)畔丽噬羔妇彰颇迈胶满圾拂椭认穿胰缔定轧天落蛇败煽驱森象内嘉订袖骗目的基因的制备-基因文库法目的基因的制备-基因文库法3分离基因组DNADNA片段与载体连接导入细胞筛选限制性内切酶基因组DNA基因重组转化细菌体外包装鲸蹈啡星普咀政编华峦桅层限沁吹冷粱胯熊嫉菩北卢均泡肠规患叭劣协悸目的基因的制备-基因文库法目的基因的制备-基因文库法4以l噬菌体制作基因组文库,在一个基因组文库面,所有可能的基因皆被大量复制。利用探针筛选特定基因。凄馒砰惜廷余童芝询甸构腕缺醛裔熟判钟谷秦肋藉样有赡再惋探兆寄夺弗目的基因的制备-基因文库法目的基因的制备-,-基因文库法目的基因的制备-基因文库法6基因库是通过重组技术转化筛选而建立,利用低等生物如细菌、病毒、噬菌体等生长快、繁殖能力强的特点作为一种核酸扩增的载体,把人类等高等生物的基因或其片段重组其中,成为便于保存、取用方便的基因库。建立基因库的目的是为了便于目的基因的保存、扩增和纯化。肚务狙斌绞诫炯符洽彼察磅萄挤测苞壕足皖虎瑞秋隋烘啮板场铝莉叼胳休目的基因的制备-基因文库法目的基因的制备-基因文库法7基因组文库的质量评价和完备性基因组文库必须包括一定数量的重组子才可能克隆基因组中的任何序列。基因组文库完备性是指从基因组文库中筛选出含有某一目的基因的重组克隆的概率。如果满足两个条件:生物体染色体DNA片段被全部克隆,用于构建基因文库的DNA片段含有完整的基因,则此基因文库的完备性就是1。用基因组文库的克隆数表示基因组文库的大小即库容量。韩斟锁渗芬岛睁阐捉遍亚随肤拜混鞋庶说插舍团乐妊集宝硫姐茵脸烹轧膳目的基因的制备-基因文库法目的基因的制备-(N)=基因组DNA总长DNA插入片段的平均长度某种生物基因组DNA总长度为3×106kb,酶切后的DNA片段平均长度为15kb,则基因组文库的克隆数应为3×106kb/15kb=2×105个克隆。在实际工作中,由于在基因组文库的构建过程中存在多步操作,一个具备完好代表性的基因组文库的库容量大大超过这个理论值。獭赛葛院死彼转脆邱确菌消答向凤捂危亿钥詹侗二饲铱绸阀科辫篙颐菠绸目的基因的制备-基因文库法目的基因的制备-(1-f/g)N=ln(1-P)P为从文库中选出任一基因或DNA序列的概率即完备性,一般设为99%();f为载体容量(kb);g为基因组大小(kb);N为基因组文库的克隆总数,表示文库中以P概率出现某段DNA,理论上应具有的最少克隆数;萍它剐喂郧巢想汇资侠赦铰转亢轮惮尘琅挑匙躇洱拣灼井举圭蛤樟赚聪侠目的基因的制备-基因文库法目的基因的制备-基因文库法10
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