中药复方对胃粘膜细胞癌变的抑制与逆转作用研究.pdf

摘要一、亚硝胺类化合物诱导细胞模型的建立二、中药复方对诱导细胞恶性转化的抑制作用胃癌发生发展的过程很少直接从胃粘膜上皮产生,而是由多基因异常引起的渐进性的变化,在癌变前多数经历了较长的演变,即由正常胃粘膜转变成为癌前病变,部分发展成胃癌。胃黏膜的肠上皮化生及不典型型增生主要存在于慢性萎缩性胃炎,虽然不典型型增生是公认的癌前病变,有发展成肿瘤细胞的潜在趋势,但是癌前病变是一个多步骤、多因素的复杂过程,不是所有的癌前病变都会发展成为胃癌,有的可以在进程中停止发展,甚至发生逆转或消失。此中药复方由雪胆、老龙皮、白术、半枝莲、海螵蛸、黄芪组成。全方针对性强,配伍严谨,符合中医药的“未病先防”思想,对胃癌癌前病变的预防和治疗有非常重要意义。本文利用亚硝胺类化合物成功诱导出了胃癌癌前病变的细胞模型,并进行了癌变相关蛋白的检测,借助免疫印迹,实时荧光定量等生物学检测方法评价了中药复方对癌前病变的细胞株以及恶性程度较高的细胞株中相关分子的影响,初步探究了其抑制和逆转胃黏膜细胞癌变的作用。使用与胃癌相关的亚硝胺类化合物谆甆’硝基窍趸杂郎化的人胃粘膜上皮细胞系进行恶性转化实验,得到转化后细胞,称为细胞。比较观察细胞和细胞的形态,。经处理后的细胞狹,细胞的形态以及生长特性均发生了改变。随传代的延续,细胞呈现典型的“岛样”克隆生长。└〖<觳庵幸└捶蕉诱导的细胞中癌变相关蛋白甤.、甋表达的影响,实时荧光定量检测中药复方对诱导的细胞中虻挠跋臁法检测结果显示,中药复方对细胞有~定的生长抑制作用,说明中药复方在体外具有一定的抗肿瘤细胞增殖的活性,从中选出合适的给药浓度。进一步研究发现中药复方下调诱导的细胞中癌变相关蛋白甤琍—。实时荧光定量分析中药复方对诱导的细胞琓的表达产生了一定的抑制作用。三、中药复方对细胞恶性程度的逆转作用ḿ觳庵幸└└捶蕉细胞迁移的影响,窒笛榧觳庵幸└
』㈣煳关键词:中药复方:猚篜::硕士研究生刘雪┪锘指导教师孙向红教授移、侵袭、克隆形成以及非锚着依赖性生长都产生了较好的抑制作用,进一步研究力的影响,克隆形成实验检测中药复方对细胞克隆形成能力的影响,软琼脂实验检测中药复方对细胞非锚着依赖性生长的影响,。法检测结果显示,中药复方对细胞有一定的生长抑制作用,说明中药复方在体外具有一定的抗肿瘤细胞增殖活性,从中选出合适的给药浓度。划痕实验,窒笛椋寺⌒纬墒笛椋砬碇笛楸砻髦幸└—泶铩J时荧光定量分析,中药复方对细胞琓的表达产生了一定的抑制作用。本论文综合利用现代药理学和分子生物学检测方法,成功建立了诱导的细胞模型。初步探讨了中药复方对于胃癌癌前细胞株以及恶性程度较高的癌细胞株的作用,揭示了此中药复方对胃黏膜细胞癌变的抑制与逆转作用,为此复方合理开发利用提供了科学的依据。篢,琾瑂琩瑃,猣琻琽
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目录引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”第一章亚硝胺类化合物诱导细胞恶性转化细胞模型的建立⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·第二章中药复方对诱导的细胞恶性转化的抑制作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··ḿ觳庵幸└⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯...窍趸衔颩盏糋一赴;,细胞中癌变相关蛋白狢琍表达的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯··.赴翁Ц谋洹,细胞中癌变相关蛋白瓹琍表达的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯一,细胞中癌变相关蛋白泶锏牟舛ā实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.└捶蕉訫盏嫉腉一赴邪┍⋯⋯.幸└捶蕉訫盏嫉腉一赴邪┍湎喙氐鞍譔。表达的测定⋯⋯.幸└捶蕉訫盏嫉腉一赴邪┍湎喙氐鞍譖表达的测定⋯⋯⋯··.幸└⋯⋯⋯⋯⋯⋯.臣蒲Х椒ā实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯