mir-15a和mir-16-1诱导人淋巴瘤Raji细胞株的凋亡.pdf

第卷第期暨南大学学报医学版. .
年月.
一和诱导人淋巴瘤
细胞株的凋亡
谌琴, 何冬梅, 张洹, 郭敏
暨南大学医学院血液病研究所,广东广州
摘要目的:探讨和诱导人淋巴瘤酬细胞株的凋亡。方法:利用脂质
体法将化学合成的和寡核苷酸,随机序列,分别转染细胞。采用间接免疫荧光及流式细胞仪
检测蛋白表达情况,,台盼蓝拒染法和法检测和
.对细胞的生长抑制作用,染色观察细胞凋亡形态,流式细胞仪/双染色法检测细
胞凋亡率。结果:,蛋白的表达量
降低,与空白对照组和随机序列组有显著性差异.;法显示各组间的表达无显著性
差异;台盼蓝拒染法和法显示,转染后各时间点和寡核苷酸组细胞的生长受到抑制,
染色可见明显凋亡细胞,流式细胞仪/双染色法检测显示,.组早期凋亡率和晚期凋亡
率分别为.%和.% ,..组早期凋亡率和晚期凋亡率分别为.%和.% ,明显高于空白对照组和
随机对照组。结论:和..可诱导淋巴瘤细胞凋亡。
关键词微; 淋巴瘤; 微一; 微一; 细胞凋亡
中图分类号.;. 文献标识码文章编号】———

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【收稿日期】一—
【基金项目】广东省自然科学基金项目
【作者筒介】谌琴一。女,硕士研究生,研究方向:反义技术与白血病的研究
通讯作者:何冬梅。:—;:..
暨南大学学报医学版第卷
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是个左右核苷酸组成自美国公司,—试剂盒购自上海申
的内源性,通过切割或翻译抑制两种机能博彩公司,一培养基为产品,精
制,在转录后水平对基因表达进行负性调控。—制小牛血清购自杭州四季青生物工程有限公司,脂
是一种广泛存在的调控基因表达的小分子质体转染试剂盒为
,在细胞的生长、发育、分化、增殖和凋亡中起重公司产品。
要作用。最近研究表明,参与肿瘤的发生与
方法
发展,其中一、.、、.、
、、一一、一. 细胞培养
等与人类造血系肿瘤密切相关¨。将细胞接种于含体积分数为% 的新生
,无青霉素、,
表达与呈负相关。蛋白主要通过作用在含体积分数为%的培养箱℃连续培养,
于线粒体来实现其抑制凋亡的生物学活性,因此当每、天换液传代培养,使细胞维持对数生长。
.和一丢失或突变时,蛋白的表达量. 转染
上调,细胞凋亡受阻,因而导致肿瘤发生。本研究利采用脂质体法进行转染实
用脂质体法将化学合成的一和验,实验分组:一组、.—组、随机序列组
.—寡核苷酸转染人高表达的人淋巴瘤和空白对照组,每组复孔。先用缓冲液将细
细胞,观察其诱导淋巴瘤细胞凋亡的作用。胞冲洗,再用无血清培养液重悬细胞沉淀,接种于
孔或孔板中,每孑细胞密度为ב/
材料
×/,每孔接种细胞液,再
人淋巴瘤细胞株由本实验室保存。根将配好的—一脂质体复合物,..一脂质
据://...// 体符合物,随机序列一脂质体复合物