天竺葵叶片显微结构观察.doc

研究生课程论文(作业)封面( 2009 至 2010 学年度第2 学期) 课程名称:植物显微技术课程编号: 学生姓名:郑坤学号: 904257 年级: 2009 级提交日期: 2010 年6 月 17 日成绩: __________________ 教师签字: __________________ 开课--- 结课:第周--- 第周评阅日期: 年月日东北农业大学研究生部制植物显微技术-1- 天竺葵叶片显微结构观察( 东北农业大学园艺学院蔬菜学专业郑坤 904257) 摘要: 天竺葵, 拉丁名: Pelargonium hortorum , 别名: 洋绣球、入腊红、石腊红、日烂红、洋葵、天竺葵、驱蚊草。生性健壮,很少病虫害; 其适应性强,喜阳光,好温暖,稍耐旱,怕积水,不耐炎夏的酷暑和烈日的曝晒。本文通过对其叶片经行石蜡切片自作,初步掌握了石蜡切片的制作过程。关键词:天竺葵,石蜡切片,显微结构天竺葵,别名洋绣球,原产南非,是多年生的草本花卉。叶掌状有长柄,叶缘多锯齿,叶面有较深的环状斑纹。花冠通常五瓣,花序伞状,长在挺直的花梗顶端。由于群花密集如球,故又有洋绣球之称。花色红、白、粉、紫变化很多。花期由初冬开始直至翌年夏初。盆栽宜作室内外装饰;也可作春季花坛用花。 1 材料与方法 材料天竺葵叶片,采自东北农业大学校园内 实验方法 取材以及固定取天竺葵叶片切割成小块。采用卡诺氏液( 纯酒精∶冰醋酸=3 : 1) 固定液固定。单瓶固定液使用量 3-5mL ,固定 1h( 也可以长期保存)。 脱水依次使用 50% 、 60% 、 70% 、 85% 、 95% 、 100% 各级乙醇溶液脱水各 2~4 个小时, 组织中含有大量的水分,脱水不彻底,将影响到与石蜡的包埋。脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。在更换高一级的脱水剂时,最好不要移动材料以免损坏, 可用吸管吸出器皿中的脱水剂, 再用吸水吸尽器皿内剩余液, 然后于皿中加入高一级脱水剂。如需过夜, 应停留在 70% 酒精中。脱水必须彻底, 否则不易透明, 甚至使透明剂内出现白色混浊现象。 透明两次梯度, 1/2 纯酒精、 1/2 二甲苯与番红配成饱和液 2h ,二甲苯 2h 。使用透明剂时,要随时盖紧盖子,以免空气中的水分进入。更换每级透明剂,动作要迅速,一方面为了不使材料块干涸,另一方面能避免吸收湿气。加入番红可以使微小材料容易辨认, 也同时可以缩短番红固绿双重染色中番红的染色时间。 浸蜡和包埋先用石蜡逐渐取代二甲苯,再用纯石蜡包埋材料。石蜡的熔点在 52~ 60℃之间,软的材料用熔点 54~ 56℃的石蜡,稍硬的材料用熔点为 58~ 60℃的石蜡。具体过程是:常温下将削好的蜡屑,逐渐投入盛有材料的二甲苯小瓶中至饱和→ 36~ 40℃温箱中加蜡屑植物显微技术-2- →将小瓶中原液倒去 1/2 后补入 1/2 纯蜡( 已熔化的), 此过程重复 2~3次→全部换纯蜡2 次(每步骤 2h)→包埋。将经过浸蜡的天竺葵叶片连同熔化的石蜡,一起倒入置备好的纸盒内,然后放在凉的机器上,使其立刻凝固成蜡块。待石蜡完全凝固(约 30min) 后即可取出备用。 切片与常规方法一致,要注意蜡块一定要平整。切片时,右手摇动旋转轮