天竺葵叶片显微结构观察.doc

天竺葵叶片显微结构观察
研究生课程论文(作业)封面
( 2009 至 2010 学年度第 2 学期)
课程名称:植物显微技术
课程编号:
学生姓名:郑坤
学号:904257
年级:2009级
提交日期: 2010 年 6 月 17 日
成绩:__________________
教师签字:__________________
开课---结课:第周---第周
评阅日期: 年月日
东北农业大学研究生部制
(东北农业大学园艺学院蔬菜学专业郑坤 904257)
摘要:天竺葵,拉丁名:Pelargonium hortorum,别名:洋绣球、入腊红、石腊红、日烂红、洋葵、天竺葵、驱蚊草。生性健壮,很少病虫害;其适应性强,喜阳光,好温暖,稍耐旱,怕积水,不耐炎夏的酷暑和烈日的曝晒。本文通过对其叶片经行石蜡切片自作,初步掌握了石蜡切片的制作过程。
关键词:天竺葵,石蜡切片,显微结构
天竺葵,别名洋绣球,原产南非,是多年生的草本花卉。叶掌状有长柄,叶缘多锯齿,叶面有较深的环状斑纹。花冠通常五瓣,花序伞状,长在挺直的花梗顶端。由于群花密集如球,故又有洋绣球之称。花色红、白、粉、紫变化很多。花期由初冬开始直至翌年夏初。盆栽宜作室内外装饰;也可作春季花坛用花。
1材料与方法

天竺葵叶片,采自东北农业大学校园内


取天竺葵叶片切割成小块。采用卡诺氏液(纯酒精∶冰醋酸=3:1)固定液固定。单瓶固定液使用量3-5mL,固定1h(也可以长期保存)。

依次使用50%、60%、70%、85%、95%、100%各级乙醇溶液脱水各2~4个小时,组织中含有大量的水分,脱水不彻底,将影响到与石蜡的包埋。脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。在更换高一级的脱水剂时,最好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。如需过夜,应停留在70%酒精中。脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象。

两次梯度,1/2纯酒精、1/2二甲苯与番红配成饱和液2h,二甲苯
2h。使用透明剂时,要随时盖紧盖子,以免空气中的水分进入。更换每级透明剂,动作要迅速,一方面为了不使材料块干涸,另一方面能避免吸收湿气。加入番红可以使微小材料容易辨认,也同时可以缩短番红固绿双重染色中番红的染色时间。

先用石蜡逐渐取代二甲苯,再用纯石蜡包埋材料。石蜡的熔点在52~60℃之间,软的材料用熔点54~56℃的石蜡,稍硬的材料用熔点为58~60℃的石蜡。具体过程是:常温下将削好的蜡屑,逐渐投入盛有材料的二甲苯小瓶中至饱和→36~40℃温箱中加蜡屑
- 1 -
→将小瓶中原液倒去1/2后补入1/2纯蜡(已熔化的),此过程重复2~3次→全部换纯蜡2次(每步骤2h)→包埋。
将经过浸蜡的天竺葵叶片连同熔化的石蜡,一起倒入置备好的纸盒内,然后放在凉的机器上,使其立刻凝固成蜡块。待石蜡完全凝固(约30min)后即可取出备用。

与常规方法一致,要注意蜡块一定要平整。切片时,右手摇动旋转轮手柄,左手用