苹果的组织培养.doc

苹果的组织培养.doc苹果的组织培养苹果的组织培养是采用无菌培养技术,将来自优良植物的茎尖、腋芽、叶片、等器官以及他们的组织切片进行离体培养,使之在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法o1973年Jones等培育苹果砧木M・26和M・9的茎尖获得成功,之后美国的Button等利用此技术大量繁殖了英国东茂林试验站育成的苹果砧木M・27,促进了其推广应用。我国在这方面也进行了大量工作,加速了苹果新品种的推广应用。另外,由于离体技术处理严格,所以很容易脱除昆虫、一般真菌病害和一些细菌病原及病毒,是复壮品种的有效措施。已成功脱除的病毒和病害有苹果褪绿叶斑病毒、花叶病病毒、轮纹病等。1苹果矮化砧组织培养(1)材料方法:苹果矮化砧GM256,春季芽萌动后取田间的枝条,将萌发的新芽,用自来水冲洗后75%~1min,%升汞5min,,接种于诱导培养基上。以MS为基本培养基,,培养室温度24°C,湿度60%左右。将初代培养出的芽接种到增殖培养基上,连续继代(每次25-30d)2次。将长至2cm左右的试管苗接入生根培养基中诱导生根。(2)结果:外植体诱导。外植体接种到诱导培养基中,在正常的光照培养条件下均不能诱导出芽,暗培养20d和30d的黄化苗经光照后很快变绿,正常生长。而暗培养40d的黄化苗玻璃化严重,经光照后也很难正常生长。诱导培养基中,60d后,当BA浓度低于2mg/L,NAA浓度高于1mg/L时不利于矮化砧芽的诱导。IBA也不适宜矮化砧芽的诱导。适宜的浓度和种类是:MS+BA2mg/L+。增殖。诱导培养出的芽接种到增殖培养基上连续继代(每次25~30d)2次,在MS++,MS++,增殖快,可增殖5~6倍。,,只增殖1-2倍,有叶片黄化,玻璃化苗现象。生根培养。将长至2cm左右的试管苗接入接入生根培养基中诱导生根,20d后,1/2MS+,生根快,生根数多,,%,浓度超过2mg儿则抑制生根,只形成愈伤组织。暗培养和光培养对生根无明显差别。2苹果抗寒砧木组培(1)材料方法:砧木品种:珠美海棠、小金海棠、77-,-,先用75%I酒精浸泡15s,%升汞浸4-5min,无菌水冲洗干净。以,MS为基本培养基,蔗糖浓度为3%,%,附加不同种类、浓度激素。(2)结果:芽绣导。不同砧木品种的芽绣导对激素的要求是有差异的,30d后,MS++,幼苗粗壮,;MS++-34最适培养基,;MS++,。生根培养基。1/2MS+、77・34、珠美海棠的最适生根培养基,生根率均达94%左右,;生根苗移栽。选取生长健壮、-,经半开瓶锻炼苗7d