淀粉酶的固定化生产.ppt

实验四、淀粉酶的固定化生产一、实验目的二、实验原理三、实验材料四、实验步骤五、实验结果六、注意事项七、思考题1学习细胞固定化的原理,通过海藻酸钠包埋固定产淀粉酶的酵母,掌握菌体包埋固定的基本方法,了解固定化细胞在实际中的应用。一、实验目的2细胞固定化技术:固定化细胞就是被限制自由的细胞。即采用物理或化学的方法将细胞固定在载体上或限度在一定的空间界限内,但细胞仍保留催化活性并能反复或连续使用。二、实验原理游离细胞固定化细胞3最令人感兴趣的是固定化增殖细胞,因为多数微生物代谢的产物与其生长相关。微生物在固定化后以其生长状态可分为3类:固定化死细胞;固定化活细胞(休眠状态);固定化增殖细胞(生长状态)。4微生物细胞的固定化方法有:(1)吸附法,(2)包埋法,(3)不用载体法。包埋法56本实验采用凝胶包埋的固定化方法,把酵母细胞悬浮在海藻酸钠溶液中,再滴加入CaCl2溶液,形成海藻酸钙凝胶小球,细胞包埋在凝胶的小孔中,制成固定化细胞。7三、:面包酵母。:①发酵培养基:葡萄糖:4%;蛋白胨:1%;磷酸二氢钾:%;七水硫酸镁:%酵母膏:%,pH:-。②固定化培养基:淀粉:2%;葡萄糖:%;蛋白胨:1%;磷酸二氢钾:%;七水硫酸镁:%;酵母膏:%,pH:-。。8四、实验步骤(一)培养基灭菌取250ml三角瓶,分别放入配好的液体培养基100ml,灭菌冷却。(二)种子活化和接种酵母菌接入培养基,25℃培养活化,取活化后的酵母菌分别接入已灭菌冷却的三角瓶培养瓶,振荡混匀。9(三)培养将已接种的三角瓶培养液置于振荡培养箱,200r/min,25℃培养,离心收获菌体并用无菌水洗涤一次,制备菌悬液,使其中酵母菌数为数量级107个/ml。(四)海藻酸钠及交联剂的制备①海藻酸钠溶液的制备:,,,,,分别置于250ml三角瓶中,各加入100ml蒸馏水,放置并搅拌,灭菌。②交联剂的制备:配制2%浓度的CaCl2,灭菌。四、实验步骤10