实验五食品中还原糖的测定.doc

实验八食品(炼乳)中还原糖含量的测定一、实验目的1、了解食品中还原糖的含量;2、学习直接滴定法测定还原糖的原理,并掌握其定糖方法。3、通过对实验结果的分析,了解影响测定准确性的因素。二、原理,食品中的还原糖主要指具有还原性的葡萄糖、果糖、戊糖、乳糖、麦芽糖等,还原糖之所以具有还原性,就是由于其分子中含有游离醛基(-CHO)或酮基(>C=O)。测定还原糖的经典化学方法都就是以其能被多种试剂氧化为基础的。在这些方法中,以各种根据碱性酒石酸铜溶液氧化作用改进方法的应用最广。本实验就就是采用使用碱性酒石酸铜作为氧化剂的直接滴定法。碱性酒石酸铜溶液A、B二液等体积混合时生成的天蓝色Cu(OH)2沉淀后,立即与酒石酸钾钠起反应生成深蓝色的酒石酸钾钠铜络合物。此络合物与还原糖共热时,二价铜即被还原糖还原为一价的红色氧化亚铜沉淀,氧化亚铜沉淀与亚铁氰化钾反应,生成可溶性化合物,达到终点时,稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色,溶液呈淡黄色而指示滴定终点,根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量,以及测定样品液所消耗的体积,计算还原糖含量。反应式如下:CuSO4+2NaOH→Cu(OH)2↓+Na2SO4COOKCOOK││CHOHCHO│+Cu(OH)2→│Cu+2H2OCHOHCHO││COONaCOONaCOOKCOOK│CHOCOOH│CHO││CHOH│Cu+(CHOH)4→(CHOH)4+│+Cu2O↓CHO││CHOH│CH2OHCH2OH│COONaCOONa三、仪器与试剂1、仪器(1)容量瓶100ml、250ml(2)三角瓶250ml(3)碱式滴定管50ml或25ml(4)烧杯100m1(5)吸管5ml、50ml(6)分析天平(7)电炉1KW可调(8)恒温水浴锅2、试剂(1)碱性酒石酸铜溶液A液:称取15、00g硫酸铜(CuSO4·5H2O)(AR)及0、05g次甲基蓝,溶于蒸馏水中并稀释至1000ml。(2)碱性酒石酸铜溶液B液:称取50g酒石酸绅钠(AR)与75gNaOH(AR),溶于蒸馏水中,再加入4g亚铁氰化钾,完全溶解后用蒸馏水稀释至1000ml,贮存于具橡胶塞玻璃瓶中。(3)乙酸锌溶液:称取21、9g乙酸锌,加3ml冰醋酸,加水溶解并稀释至100ml。(4)亚铁氰化钾溶液:称取10、6g亚铁氰化钾,加水溶解并稀释至100ml。(5)葡萄糖标准溶液:准确称取1、0000g至(96±2)℃干燥2h的纯葡萄糖,加水溶解后加人5ml盐酸,并以水稀释至1000ml。此溶液葡萄糖浓度为l、0mg/ml。3、样品炼乳四、实验步骤1、样品制备称取炼乳样品约2、50~5、00g于100ml烧杯中,加入50ml水溶解,转移到25Oml容量瓶中,并用少量水洗涤烧杯,洗液并人容量瓶中。慢慢加入5ml乙酸锌溶液与5ml亚铁氰化钾溶液,加水至刻度,混匀。沉淀,静止30min,用干燥小滤纸做成小菊花形干过滤,弃去初始滤液25ml,其余滤液备用。2、碱性酒石酸铜溶液的标定于25Oml三角瓶中吸取碱性酒石酸铜A液及B液各5、0ml,加1Oml水与玻璃珠3粒,从滴定管滴加约9ml葡萄糖(或其她还原糖)标准溶液并摇匀,置于电炉上加热至沸腾(要求控制在2min内沸腾),然而趁热以每2s滴加1滴的速度继续滴加葡萄糖(或其她还原糖)标准溶液,直至溶液蓝色刚好退