菌落总数测定.doc

菌落总数得测定基础知识:菌落就是指细菌在固体培养基上生长繁殖而形成得能被肉眼识别得生长物,它就是由数以万计相同得细菌集合而成。当样品被稀释到一定程度,与培养基混合,在一定培养条件下,每个能够生长繁殖得细菌细胞都可以在平板上形成一个可见得菌落。菌落总数就是指在一定条件下(如需氧情况、营养条件、pH、培养温度与时间等)每g(mL)检测样品所生长出来得细菌菌落总数。由于厌氧或微需氧菌、有特殊营养要求得以及非嗜中温得细菌,现有条件不能满足其生理需求,故难以繁殖生长。因此菌落总数并不表示实际其中得所有细菌总数,也不能区分其中细菌得种类,所以有时被称为杂菌数、需氧菌数等。菌落总数测定就是用来判定食品被细菌污染得程度及卫生质量,它反映食品在生长过程中就是否符合卫生要求,以便对被检样品做出适当得卫生学评价,菌落总数得多少在一定程度上标志着食品卫生质量得优劣。中国国家标准就是国内常用得检验方法。菌落总数测定得卫生学意义:食品本身得新鲜程度加工、贮存运输过程中就是否受到污染卫生学指标:食品中菌落总数越多,则食品含有致病菌得可能性越大,食品质量越差;菌落总数越小,则食品含有致病菌得可能性越小、须配合大肠菌群与致病菌得检验,才能对食品做出较全面得评价。细菌在平板计数琼脂上得菌落特征蔓延菌在平板计数琼脂上得菌落特征方法来源:GB4789。2-2016食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定1、范围本标准规定了食品中菌落总数(Aerobicplatecount)得测定方法。本标准适用于食品中菌落总数得测定。2、术语与定义菌落总数aerobicplatecount食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度与培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成得微生物菌落总数。3、设备与材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其她设备与材料如下:3。1 恒温培养箱:36℃±1℃。:2℃~5℃、3。3恒温水浴箱:46℃±1℃。3。4天平:感量为0。1g。。3、6无菌吸管:1mL(具0。01mL刻度)、10mL(具0。1mL刻度)。3、7 无菌培养皿:直径90mm。3。8放大镜或/与菌落计数器、4、培养基与试剂4、1平板计数琼脂培养基按照称取23。5g培养基溶于1000mL蒸馏水得比例进行配置,分装到锥形瓶,121℃高压灭菌15min。4、%无菌生理盐水称取8。5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水、一般用1000mL锥形瓶配置,称取6。8g得氯化钠,加入800mL蒸馏水,121℃高压灭菌15min。5、检验程序菌落总数得检验程序见下图。6、操作步骤6、1样品得稀释6、1。1固体与半固体样品:称取25g样品置无菌袋内,加入225mL灭菌生理盐水,拧紧振摇无菌袋使其混合均匀,制成1∶10得样品匀液、6、1、2液体样品:以无菌吸管吸取25mL样品置盛有225mL生理盐水得无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量得无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1∶10得样品匀液。6。1。3用1mL无菌吸管吸取1∶10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于盛有9mL生理盐水得无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管使其混合均匀,制成1∶100得样品匀液、6、1。4按6、1、3操作,制备10倍系列稀释样品匀液、每递增稀释一次,换用1次1mL无菌吸管。6、 根据对样品污染状况得