临床医师微生物检验--细菌的培养与分离技术.docx

临床医师微生物检验--细菌的培养与分离技术.docx临床医师微生物检验一细菌的培养与分离技术本章内容一、基本条件二、细菌的接种与分离技术三、细菌培养的方法、细菌的生长现象五、细菌L型的检查基本条件(一) 细菌实验室:生物安全柜。(二) 无菌实验室(三) 基本设备和器具:温箱、C02培养箱、厌氧培养设备;显微镜;高压蒸汽灭菌器、干烤箱;接种环和接种针;火焰灯或洒精灯;平皿、试管、吸管等玻璃器皿,以及离心机、天平等。细菌的接种与分离技术平板划线分离法:分散生长,各自形成菌落。连续划线法:杂菌不多。分区划线法:杂菌多。斜血接种法:单个菌落纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。液体接种法:多用于一些液体生化试验管的接种。穿剌接种法:半固体培养基,接种针。倾注平板法:测定牛乳、饮水和尿液等标本细菌数将标本适当稀释后,取…定量加入已灭菌的平皿内,再倾入己溶化并冷却至45°C左右的定量培养基,混匀,待凝固后倒置、培养。涂布接种法:常用于纸片法药物敏感性测定,也可用于被检标本中的细菌计数。细菌的培养方法培养条件:根据临床初步诊断及待检细菌的种类,选用不同环境条件进行培养。需氧培养 J微需氧培养 [同一标本可同时用二氧化磯培祥(5%~10%C0jf两种或三种条件培养厌氧培祥 」细菌的生长现象分离培养基上菌落的生长现象观察菌落的大小、形状、突起、边缘、颜色、表面、透明度等。血琼脂上的溶血:a溶血:菌落周围出现绿色环状,红细胞外形完整无缺。B溶血:菌落周围形成一个完全清晰透明的环,红细胞溶解。Y溶血:没有溶血,红细胞无溶解。双环:菌落周围完全溶解的晕圈外有一个部分溶血的第二气味液体培养基中的生长现象■沉淀、菌膜,气味和色素等。细菌数量达106〜107CFU/ml,培养肉汤才见混浊。血液培养的检查和传代培养:肉眼观察其生长现象,如溶血、产生气体或混浊度等。半固体培养基中细菌的动力有动力的细菌除了在穿刺接种的穿刺线上生长外,在穿刺线的两侧均可见混浊或细菌生长的小菌落C细菌L型的检査标本采集:无杂菌污染的组织或体液标本应加20%蔗糖无菌溶液保持高渗;血液标本应接种高渗肉汤增菌培养。分离培养:标本接种到高渗肉汤增菌培养1〜7d,然后转种L型平板和血平板379培养2〜7d。3•生长现象:常有油煎蛋样菌落(典型L型菌落)、颗粒型菌落(G型)和丝状菌落(F型)三种类型。『正确答案」C『答案解析」平板划线分离法:分散生长,各自形成菌落。连续划线法:杂菌不多。分区划线法:杂菌多。在临床细菌学检验中,含菌量较多的标本如粪便,接种方法适宜用平板倾