层粘连蛋白β2LAMβ2ELISA试剂盒说明书.doc

层粘连蛋白β2(LAMβ2)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用 标本:体液层粘连蛋白 β2(LAMβ2)ELISA试剂盒试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验( ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。 先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。 人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的 HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物 A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中 BFGF的浓度呈比例关系。层粘连蛋白 β2(LAMβ2)ELISA试剂盒自备材料蒸馏水。加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物 A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。层粘连蛋白 β2(LAMβ2)ELISA试剂盒操作注意事项试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物 A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。 避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取 OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。层粘连蛋白 β2(LAMβ2)ELISA试剂盒样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后, 1000 ×离g心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。 1000 ×离g心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000 离心×g10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分 -70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在 37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。(50)×的稀释:蒸馏水 50倍稀释。层粘连蛋白 β2(LAMβ2),将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。加入稀释好后的标准品 50ul于反应孔、加入待测样品 50ul于反应孔内。立即加入 50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀, 37℃温育1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡 30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此