实验五白细胞分类计数.pptx

2020/8/71白细胞分类计数(differentioncountofleukocyte)实验二谢海啸2020/8/72一、白细胞分类计数白细胞分类计数是将血液制备成涂片,瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形态特征进行分类计数。通常分类100个白细胞,计算得出各种白细胞所占百分比。2020/8/73瑞氏染料溶于甲醇,离解为带正电的碱性美兰(M+)和带负电的酸性伊红(E-)离子。细胞的染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分的化学性质不同,对染料的亲和力也不一样,故可呈不同的着色特点。瑞氏染色原理:2020/8/74血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质,故与酸性染料伊红结合而染成红色,呈嗜酸性。细胞核的核蛋白为酸性物质,故与碱性染料美兰结合,染成深蓝色或深紫红色,呈嗜碱性。中性颗粒与美兰和伊红同时结合而染为淡紫红色,呈嗜中性。染色原理:2020/8/75[器材]光学显微镜推片,载玻片[试剂](~)香柏油[标本来源]EDTA-K2抗凝全血2020/8/76[操作]1)推片:血膜厚薄适中,边缘整齐,外观呈舌形,头、体、尾分明。2)干燥3) 1)准备:血膜干透后,用蜡笔在两端划线,以防止染色时染液外溢。将血涂片放染色架上。2)加染液:在涂片上滴加瑞氏染液数滴,以染液覆盖整个血膜为度,稍静置1min。3)加缓冲液:滴加缓冲液等量或多些,与上述染液充分混匀。4)染色:)冲洗:不要先倒掉染液,平持血涂片用流水缓缓冲洗干净。6)干燥:直立血涂片,使其自然干燥。2020/8/78血涂片制作2020/8/79良好血涂片外观-羽(子弹头)状尾部-周边有空白-无划痕羽状尾部2020/8/710不良血涂片