p38 mapk信号通路对干细胞体外扩增调控机制研究.pdf

中山大学
博士学位论文
P38 MAPK信号通路对干细胞体外扩增调控机制的研究
姓名:彭娟
申请学位级别:博士
专业:眼科学
指导教师:刘祖国
20090601
1
2
信号通路对干细胞体外扩增调控机制的研究中文摘要专业:博士研究生:师:眼科学彭娟刘祖国教授导化学烧伤、热烧伤、先天性无虹膜、狫综合征、瘢痕类天疱疮等自身免疫性疾病,都会导致表皮的组织缺失。对于这些疾病目前人们还没找到各种原因引起的表皮缺乏性疾病是临床常见的治疗比较棘手的病种。烧伤,创伤及各种肿瘤手术后的表皮缺失,眼表角膜缘干细胞缺乏相关的疾病,如酸碱一种最令人满意的治疗方法。自体或者同种异体表皮移植因为其排斥率低已经成为治疗首选。然而治疗依赖的体表重建又面临供体组织移植后免疫排斥,供体来源短缺等问题。所以,体外培养的组织工程治疗性研究成为许多学者关注的热点。干细胞是一种具有复制能力和多向分化潜能的细胞。在组织工程的细胞学基础中,干细胞无疑是最好的体外扩增“种子”细胞。但干细胞在体外培养条件下很容易分化而失去增殖功能,至今仍然没有一个公认的实际有效的组织工程化培养体系。理想的体外培养体系要满足两个条件,一是要在体外保持干细胞的高增殖能力,以便扩增更多的细胞用于移植。二是要能较长时间保持干细胞的特性,为体外培养和移植创造条件。信号通路是细胞内的一类稳定蛋白,研究表明其参与多种干细胞的分化过程,是信号通路的特异中山大学博士学位论文藕磐范訲细胞体外扩增调控机制的研究
3
的表皮细胞能形成更多克隆集落,克隆生成率增加。证明扩增的细胞中有更多剂后,组织块中上皮干细胞标志物琍,案咴鲋潮曛綤和能保持结膜上皮干细胞和皮肤上皮干细胞的增殖能力,同时降低其分性阻断剂。我们研究阻断剂对结膜上皮干细胞和皮肤上皮干细胞体外扩增的影响。发现培养基中加入阻断剂后,体外组织块培养法培养的结膜上皮片更光滑,细胞更紧密,边缘整齐,以单层细胞为主。而对照组的结膜上皮片细胞疏松,组织块边缘不规则,以复层细胞为主。为观察扩增细胞中的干细胞含量,我们对扩增细胞进行了克隆化培养。结果显示阻断组扩增的干细胞或前体细胞。阻断组的组织块生长指标更好。培养的组织块加入阻断表达增加。证明组织块加入阻断剂后,经过体外培养上皮干细胞仍能保持较好的干细胞特性和高增殖水平。在结膜上皮干细胞和皮肤上皮干细胞的体外克隆化培养中,加入阻断剂后,干细胞的初次出现时问提前欤寺∩陕首愣哉兆榈丁I掀た寺∧诘南赴「裘埽私仍黾樱幌赴对鍪奔涓蹋细胞表达增殖标志物;流式细胞学分析更多细胞位于凇Vっ飨啾绕胀培养液,加入斗后,其结膜上皮干细胞和皮肤上皮干细胞确实能保持更高的增殖能力。免疫组织化学染色显示,阻断组克隆内的表皮细胞表达更多的干细胞标志物如:、。而结膜上皮细胞和皮肤上皮细胞分化标志物蚄表达下降。研究首次表明,在体外培养扩增中,加入信号通路阻断剂化水平。是体外培养和扩增的有效添加剂。信号通路参与调控表皮干细胞的体外扩增。关键词:藕磐罚上赴逋馀嘌┰觥中山大学博十学位论文信号通路对干细胞体外扩增调控机制的研究
4
:,,..,—
5
巾山大学博士学位论文信号通路对赴逋饫┰龅骺鼗频难芯畉..瓹猣珹,琄..瓹,,./一—
6
缩写及中英文对照缩写英文原文中文全称中山大学博士学位论文信号通路对干细胞体外扩增调控机制的研究孀B季酆厦噶捶从岷献T说鞍譍超家族成员边缘细胞成纤维细胞生长冈子易藕抛5己妥B蓟罨蜃表皮生长因子碱性成纤维细胞生长冈子角质细胞生长因子白血病抑制因子!產—猙一
7
学位论文作者签名:专灿弼日期:。阬,月/日年易月学位论文原创性声明学位论文使用授权声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体,均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:厂日本人完全了解中山大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文并向国家主管部门或其指定机构送交论文的电子版和纸质版,有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆、院系资料室被查阅,有权将学位论文的内容编入有关数据库进行检索,可以采用复印、缩印或其他方法保存学位论文。导师签名:日期:日
8
刖吾人的表皮组织足位于人的表层起保护和支持作用的器官,表皮组织的损伤使得机体失去应有的保护,将对机体的外形及相应组织的功能产生很大的影响。大面积烧伤及创伤创面的覆盖及烧伤后期的整复治疗,一直以来都是烧伤外科